加蘭他敏的分離、烷基修飾及抑制乙酰膽堿酯酶構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是一種進(jìn)行性的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，是最常見的老年癡呆癥。目前，阿爾茨海默病已成為影響老年人健康的主要疾病之一。在美國每年用于治療AD患者的藥物費用和護理費用是在癌癥和心臟病之后排在第三位花費最大的疾病。目前最為成熟和成功治療該疾病的方法是采用膽堿酯酶抑制劑(acetylcholinesterase inhibitors，AChEIs)進(jìn)行治療，并且膽堿酯酶抑制劑是迄今為止唯一一

2、類通過美國FDA批準(zhǔn)用于治療AD的藥物。
　　 加蘭他敏是第二代AChE的抑制劑，是從石蒜屬植物石蒜鱗莖中分離純化而得的一種天然活性物質(zhì)。由于加蘭他敏在臨床上療效好且不良反應(yīng)輕，因此AD病患者對于該藥物的使用也相對較多。但目前加蘭他敏的提取率低、成本高，大大限制了加蘭他敏的使用。本實驗通過單因素實驗和正交實驗研究了從石蒜鱗莖中分離純化加蘭他敏，并對其進(jìn)行烷基化修飾，研究了加蘭他敏及其同系物對AChE的抑制作用以及兩者之間的構(gòu)效關(guān)

3、系，以期獲得高效的乙酰膽堿酯酶抑制劑。本論文主要內(nèi)容如下：
　　 1.加蘭他敏提取
　　 通過對乙醇提取分離工藝的單因素試驗，確定了乙醇的濃度、料液比、提取的溫度、提取時間作為正交試驗各因素水平。由正交試驗結(jié)果得出最佳的提取工藝分離如下：在料液比1:10，乙醇體積分?jǐn)?shù)95％，85℃下加熱回流提取2次，每次2h，提取率可達(dá)81.2％。
　　 2.加蘭他敏純化
　　 對加蘭他敏的分離純化采用兩種方法：一種是通

4、過乙酸乙酯在pH8.5萃取提取液，獲得加蘭他敏，萃取率為77％，純度為22.77％。另外一種是通過預(yù)實驗在HPLC分析柱上分析出流動相，摸索出可以用來分離加蘭他敏的流動相，再通過HPLC制備柱制備加蘭他敏，制備率為50.8％，純度為92.52％。
　　 3.加蘭他敏N-末端烷基化修飾
　　 研究了不同反應(yīng)時間、反應(yīng)物比例對N-烷基加蘭他同系物產(chǎn)率的影響影響。通過實驗分析得出：加蘭他敏同系物在反應(yīng)物比例為加蘭他敏：溴代烷烴

5、=1:5時，反應(yīng)時間為36小時，產(chǎn)物的生成率最高。最后通過元素分析、UV、IR、1H NMR、13C NMR等方法確認(rèn)了化合物的合成。
　　 4.加蘭他敏及其同系物對AChE抑制作用
　　 通過測定加蘭他敏及其同系物對AChE的抑制作用和運用軟件完成加蘭他敏同系物與AChE分子對接結(jié)果顯示，當(dāng)對加蘭他敏N-末端進(jìn)行烷基修飾后，加蘭他敏同系物對AChE的抑制作用明顯增強。當(dāng)烷基鏈碳原子數(shù)小于12時，加蘭他敏同系物對AChE