真皮間充質(zhì)干細胞在皮膚損傷修復(fù)過程中的作用.pdf

1、研究目的:
　　研究小鼠真皮間充質(zhì)干細胞(dermis-derived mesenchymal stem cells,DMSCs)在皮膚創(chuàng)傷修復(fù)過程中的影響；探討表面標記物分別為DLK1+/Sca1-、DLK1-/Sca1+兩種DMSCs對創(chuàng)傷修復(fù)造成的影響之間的區(qū)別，為進一步揭示胚胎發(fā)育過程中真皮干細胞的功能以及探討傷口修復(fù)愈合過程中復(fù)雜的作用機制提供了新的研究方向以及實驗基礎(chǔ)。
　　研究方法:
　　利用膠原酶Ⅲ對小

2、鼠胚胎的皮膚組織進行消化，通過流式細胞儀對所得細胞表面標記物進行分析。使用免疫磁珠分選技術(shù)，分選出DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+兩種類型真皮間充質(zhì)干細胞，對其進行培養(yǎng)并收集上清；使用細胞免疫熒光技術(shù)，檢測DLK1+/Sca1-細胞的表面抗原，誘導(dǎo)DLK1+/Sca1-細胞進行成骨、成脂分化。利用紫外分光光譜儀繪制DMSCs上清的紫外吸收光譜。利用小鼠皮膚線性傷口模型以及環(huán)形切除模型觀察DMSCs上清的創(chuàng)傷修復(fù)作用。

3、r>　　實驗結(jié)果:
　　1.真皮來源的干細胞通過流式細胞儀檢測，陽性表達CD29，陰性表達CD34。
　　2.通過免疫磁珠分選技術(shù)分選出DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+的兩種細胞后，在DLK1+/Sca1-細胞上用細胞免疫熒光技術(shù)，發(fā)現(xiàn)其陽性表達CD90，CD44。在促成骨、脂分化培養(yǎng)基的誘導(dǎo)下，DLK1+/Sca1-以及DLK1-/Sca1+這兩種均可以向成骨、脂方向分化。
　　3.真皮間充質(zhì)干細胞上