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1、本研究以小鼠和人為研究對(duì)象,針對(duì)上述研究熱點(diǎn)及難點(diǎn)分三部分進(jìn)行探討.第一部分:系統(tǒng)研究添加不同培養(yǎng)介質(zhì)如表皮生長(zhǎng)因子(Epidermal growth factor,EGF)、17 β-雌二醇(17beta-estradiol,17β-E2)、丙酮酸及保留卵丘細(xì)胞對(duì)小鼠生殖泡(Germinal vesicle,GV)期卵母細(xì)胞體外成熟、受精及早期胚胎發(fā)育的影響,以期優(yōu)化IVM培養(yǎng)基,為臨床提高人類卵母細(xì)胞體外成熟率及受精后胚胎發(fā)育提供新
2、的理論依據(jù).目前,國內(nèi)外尚未見該方面的系統(tǒng)研究報(bào)道.第二部分:探討常規(guī)慢速冷卻/快速復(fù)溫及玻璃化冷凍保存方法分別對(duì)GV期及第二次減數(shù)分裂中期(Metaphase Ⅱ,MⅡ)的卵母細(xì)胞復(fù)蘇、體外成熟、受精及早期胚胎發(fā)育的影響,旨在為卵母細(xì)胞的冷凍保存尋找最佳的時(shí)期和最佳的冷凍保存方法,為其更好的應(yīng)用于人類提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).國內(nèi)外尚未見有關(guān)凍存小鼠及人GV期卵母細(xì)胞及對(duì)其后體外成熟、受精和胚胎發(fā)育影響的系統(tǒng)研究報(bào)道.第三部分:應(yīng)用顯微激光系統(tǒng)及
3、其精確的測(cè)量軟件,對(duì)人胚胎透明帶厚度(Zona pellucidathickness,ZPT)、透明帶厚度變化率(Zona pellucidathicknessvariation,ZPTV)與體外受精胚胎移植結(jié)局的關(guān)系、體外培養(yǎng)的人胚胎透明帶硬度的變化及激光薄化透明帶改變透明帶變化率進(jìn)行輔助孵出的臨床應(yīng)用進(jìn)行綜合研究,旨在為選擇有種植潛力的胚胎、為輔助孵出的病人選擇、方法選擇提供基礎(chǔ)與臨床理論依據(jù).迄今對(duì)人胚胎透明帶硬度隨年齡變化的研究
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