幽門螺桿菌慢性感染誘導(dǎo)胃上皮細(xì)胞IKKβ、NF-κB、XIAP表達(dá).pdf

1、幽門螺桿菌(H.pylori)感染與人類慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌的發(fā)生密切相關(guān)。世界衛(wèi)生組織已將H．pylori列為與胃癌有關(guān)的I類致癌源。H．pylori導(dǎo)致胃癌發(fā)生的分子機制尚不清楚。日益增多的資料顯示H．pylori感染刺激宿主產(chǎn)生炎癥反應(yīng)和免疫應(yīng)答，炎癥反應(yīng)導(dǎo)致胃粘膜細(xì)胞增殖和凋亡失衡可能是胃癌發(fā)生的重要機制。 轉(zhuǎn)錄因子NF-r,B是重要的炎癥調(diào)節(jié)因子，參與炎癥和免疫反應(yīng)、細(xì)胞周期控制與分化以及對感染的反應(yīng)等。在無刺激

2、信號時，NF-~cB位于細(xì)胞質(zhì)中，與bcB結(jié)合，以復(fù)合體的形式存在，此時NF-r~B活性被IKB所抑制。當(dāng)有外來刺激信號時，IKB被hob激酶復(fù)合物(IKK)磷酸化，1wB與NF-r,B分離，解除了對NF-v,B的抑制，激活的NF．KB進(jìn)入核中調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)。 H．pylori感染能導(dǎo)致NF-rcB的激活，NF-r．B通過激活抗凋亡基因阻斷半胱天冬酶(caspase)8的激活，從而介導(dǎo)細(xì)胞存活、凋亡調(diào)控紊亂導(dǎo)致細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)變

3、。在炎癥反應(yīng)的研究中發(fā)現(xiàn)，核因子NF-r．B刺激內(nèi)皮細(xì)胞后，明顯上調(diào)了x染色體連鎖的凋亡抑制蛋白(X-linkedinhibitorofapoptosis，XIAP)的水平，XIAP是凋亡抑制蛋白IAP家族中最強有力的caspase抑制劑，它可以直接抑制caspase并可多途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，故而倍受重視。NF-~cB抑制物Ir．B的過表達(dá)能完全抑制NF-r．B和XIAP，提示XIAP是一類NF-r．B相關(guān)的調(diào)控基因。許多學(xué)者對hob的激

4、酶進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)IKKβ能特異地磷酸化Ir．B的絲氨酸，使lKB發(fā)生構(gòu)象改變被降解，NF-~B游離并移入核內(nèi)。最近有研究發(fā)現(xiàn)，IKKβ對NF-r．B的活化起決定性作用，在腸上皮缺乏IKKβ的小鼠中腫瘤的發(fā)生幾率下降了75％，在骨髓細(xì)胞缺乏IKKβ的小鼠中腫瘤的發(fā)生幾率下降了50％，證明了IKKβ是連接炎癥和腫瘤的橋梁。 由于H．pylori感染能導(dǎo)致NF-r,B的激活，結(jié)合以上研究我們推測H．pylori慢性感染胃上皮細(xì)胞中是否

5、也存在IKKB和XIAP表達(dá)增強?IKKB是否可能作為防治H．pylori感染所致慢性胃炎和胃癌病變的新靶點?到目前為止，有關(guān)H．pylori慢性感染與胃上皮細(xì)胞中IKKβ、XIAP表達(dá)關(guān)系的研究國內(nèi)外均未見報道。本實驗通過H．pylori與永生化人胃上皮細(xì)胞長期共培養(yǎng)及H．pylori灌喂CsTBL/6小鼠建立H．pylori慢性感染胃上皮細(xì)胞與動物模型，檢測體內(nèi)、外胃上皮細(xì)胞IKKβ、NF-r,B、XIAP的表達(dá)，以IKKβ反義寡核

6、苷酸轉(zhuǎn)染H．pylori慢性感染胃上皮細(xì)胞模型，進(jìn)一步觀測IKKβ反義寡核苷酸對體外胃上皮細(xì)胞IKKβ、NF-r,B、XIAP表達(dá)的干預(yù)作用，探討H．pylori慢性感染致炎、致癌的可能機制，為防治H．pylori感染所致慢性胃炎和胃癌病變尋找新的方法。本實驗分為以下兩部分： 第一部分：幽門螺桿菌慢性感染誘導(dǎo)胃上皮細(xì)胞lKKβ、NFKB、XlAP表達(dá)的體外研究第1章H.pylori慢性感染細(xì)胞模型的建立 第二部分：幽門螺