組胺N-甲基轉移酶的遺傳藥理學研究.pdf

1、我們先前的初步研究表明紅細胞HNMT活性在中國漢族人群中呈正態(tài)分布,個體差異達5.5倍,而且存在顯著的性別差異(男>女).為了進一步闡明導致HNMT酶活性個體差異的遺傳及非遺傳因素,以及HNMT遺傳多態(tài)性與疾病易感性的關系,我們對HNMT進行了一系列的深入研究并將結果在該論文中逐一報告.首先,我們研究了HNMT基因C314T和A595G兩個潛在的錯義突變在中國人群中的發(fā)生頻率及其與HNMT酶活性表型的相關性;隨后,我們采用直接測序法對H

2、NMT基因編碼區(qū)及相關調控區(qū)域內的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP)分布及其連鎖不平衡關系進行了系統(tǒng)的分析,并通過基因型—表型相關分析對新篩選到的多個高頻突變位點進行了初步的功能分析;其次,我們考察了年齡及女性月經周期兩種生理因素對紅細胞HNMT活性的影響;然后,我們對新篩選到的3個常見SNP建立了簡便的PCR-RFLP基因分型方法,并以C314T和這些新的SNPs為遺傳標記,采用病例

3、一對照研究的分子流行病學方法探討了HNMT基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓病和潰瘍病易感性之間的關系;最后,我們還對人類膜結合型HNMT異構體的存在可能性進行了初步探討.這一系列研究的結果表明:(1)C314T突變是中國人群中具有功能意義的常見SNP,但其發(fā)生頻率顯著低于美國人群,而且該突變也不能完全解釋人群中HNMT酶活性表型的個體差異.(2)在中國漢族人群中發(fā)現(xiàn)HNMT基因存在6個常見SNP(T-1637C、T-463C、C-41 1T、C

4、314T、A939G和A1097T),其中T-1637C、C-411T和A1097T為首次報道,這些SNPs之間大多處于連鎖不平衡狀態(tài),基因型—表型相關分析表明T-1 637C(或T-463C)和A939G(或A1097T)可能在一定條件下具有功能意義;(3)HNMT酶活性及其性別差異受到年齡因素的顯著影響,兒童的HNMT酶活性顯著低于成年人,HNMT酶活性的性別差異僅存在于青年人群中;(4)HNMT酶活性受到女性月經周期的影響,月經期

5、的HNMT酶活性顯著低于排卵期和黃體期,而且HNMT酶活性與體內雌激素水平之間存在顯著相關;(5)高血壓病患者的C314T突變頻率顯著低于正常對照,提示與HNMT低酶活性或高組胺水平相關的C314T功能突變可能作為高血壓病的保護因素;(6)以T-1637C、C-411T、C314T和A1097T四個代表性SNP及其所構成的單倍型(haplotype)為遺傳標記,未發(fā)現(xiàn)HNMT基因多態(tài)性與潰瘍病易感性之間存在相關性;(7)在紅細胞裂解液制