溫度響應型基因載體的研究.pdf

1、基因治療作為治療疾病的一種手段已經越來越多地引起人們的關注。在基因治療中，具有高選擇性和高轉染性的基因載體的使用是十分重要的。因此，開發(fā)具有可控性和較高轉染效率的智能基因載體就成為當前研究的熱點。
　　 本文通過自由基聚合的方法合成了陽離子接枝共聚物——聚(甲基丙烯酸N，N-二甲基氨基乙酯-co-(順丁烯二酸酐-聚(N-異丙基丙烯酰胺-co-甲基丙烯酸正丁酯)))(PDMNIB)，并且探討了PDMNIB與DNA分子間的相互作用以

2、及PDMNIB/DNA復合物體外的細胞轉染情況。PDMNIB是一種具有溫度響應性的陽離子接枝共聚物，通過紫外分光光度計測得了該聚合物的臨界溶液溫度(LCST)在20℃左右。瓊脂糖凝膠電泳實驗發(fā)現PDMNIB能夠很好的與DNA分子發(fā)生相互作用形成較為穩(wěn)定的復合物，并且發(fā)現制備該復合物的最佳溫度應該在PDMNIB的LCST以下。Zeta電位實驗和動態(tài)光散射實驗(DLS)進一步對該復合物的溫度響應性進行了分析，并發(fā)現PDMNIB/DNA復合物

3、的表面電荷和粒徑大小能夠被外界溫度所調控，因而具有很好的溫度響應性。通過利用在有血清和無血清條件下分別制備的PDMNIB/DNA復合物進行體外的細胞轉染可以發(fā)現，由于溫度的改變能夠影響PDMNIB與DNA分子間的相互作用，因此，在適當時刻對細胞進行短暫的低溫培養(yǎng)可以明顯地提高細胞的基因轉染效率，同時實現了溫度可控的細胞轉染。通過對PDMNIB這種新型溫度響應性基因載體的研究，豐富了基因載體的研究領域并且為進一步開發(fā)具有高轉染性和可控性的