米諾環(huán)素對(duì)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變抑制作用的研究.pdf

1、建立1型和2型大鼠糖尿病視網(wǎng)膜病變模型；從基因和蛋白水平，比較正常和糖尿病及不同濃度、時(shí)間米諾環(huán)素治療后大鼠視網(wǎng)膜環(huán)氧化酶-2(COX-2)表達(dá)的差異，觀察及研究米諾環(huán)素治療的最佳濃度、時(shí)間；比較正常和糖尿病及米諾環(huán)素治療后大鼠視網(wǎng)膜白細(xì)胞介素-1β(IL-1 β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)的差異，分析與研究糖尿病視網(wǎng)膜微環(huán)境改變的分子機(jī)制，探討糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)發(fā)生、發(fā)展的可能原因，為D

2、R防治提供新的思路。 方法 給Wistar大鼠灌胃脂肪乳10D，記錄飲食、飲水、體重變化，用毛細(xì)血管法和正糖鉗技術(shù)判定胰島素抗性。同時(shí)測定血清中空腹血糖、丙二醛(MDA)和游離脂肪酸(FFA)，四氧嘧啶大鼠腹腔注射；用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和免疫組織化學(xué)染色的方法比較正常和糖尿病及米諾環(huán)素治療7D、10D和14D后大鼠視網(wǎng)膜COX-2表達(dá)的差異；用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和免疫組織化學(xué)染色的方法比較正常和糖尿病及米諾環(huán)素

3、治療后3W、5W、7W和9W大鼠視網(wǎng)膜IL-1 β、TNF-α、iNOS表達(dá)的差異。 結(jié)果 (1)通過四氧嘧啶一次腹腔注射建立了wistar大鼠1型糖尿病的動(dòng)物模型。通過灌胃脂肪乳建立了伴有胰島素抵抗的wistar大鼠2型糖尿病的動(dòng)物模型。(2)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜COX-2的表達(dá)均高于正常對(duì)照組，并隨時(shí)間的延長而增加，有顯著性的差異(P<0.05)，其蛋白水平與基因水平的表達(dá)相一致。(3)糖尿病大鼠視網(wǎng)膜COX-2的表達(dá)

4、與糖尿病類型無關(guān)。(4)米諾環(huán)素濃度為22.5mg／kg和45mg／kg作用10天及14天均可抑制糖尿病大鼠COX-2的表達(dá)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其蛋白水平與基因水平的表達(dá)基本一致，且與糖尿病類型無關(guān)。(5)米諾環(huán)素濃度為22.5mg／kg作用14天較為理想。(6)各時(shí)間點(diǎn)(3w，5W，7w，9w)的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜IL-1β、INF-α、iNOS的表達(dá)均高于正常對(duì)照組，并隨時(shí)間的延長而增加，均有顯著性的差異(P

5、蛋白水平與基因水平的表達(dá)一致。(7)糖尿病及經(jīng)米諾環(huán)素作用后的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜IL-1β、TNF-α、iNOS在基因和蛋白水平的表達(dá)相一致，與糖尿病類型無關(guān)。(8)經(jīng)米諾環(huán)素作用后的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜表達(dá)IL-1β、TNF-α、iNOS減少，與糖尿病模型組比較有顯著性的差異(P<0.05)。結(jié)論建立了Wistar大鼠l型和2型糖尿病的動(dòng)物模型；糖尿病大鼠視網(wǎng)膜COX-2的表達(dá)均高于正常對(duì)照組，可被米諾環(huán)素抑制；米諾環(huán)素抑制糖尿病大鼠COX