蘭科植物提取物中血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑的研究.pdf

1、本文研究了一種蘭科(Orchidaceae)植物中血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)活性有效成分的篩選和提取，利用高效液相層析(HPLC)進(jìn)一步分離純化了ACEI，以及ACEI活性有效成分的體內(nèi)降壓實驗。 采用硫酸銨沉淀法成功地從兔肺中提取得到高活力的ACE酶，粗酶液比活力分別為5.19U/mg(以FAPGG為底物)、4.94U/mg(以HHL為底物)。比較了兩種方法測定ACE活性的特點，以FAPGG為底物的方法，操作比較簡單，

2、成本較低，但易受樣品中色素的干擾，以HHL為底物的方法，操作步驟稍繁瑣，但影響因素偏少，特別適合存在色素干擾的樣品。 以一種蘭科植物的花為原料，采用乙醇浸漬法、水浸漬法和兩相溶劑萃取法分別提取其中的有效成分，通過測定提取物對血管緊張素轉(zhuǎn)換酶活性的抑制，發(fā)現(xiàn)乙醇浸提法提取率較高，且提取物易保存、易回收，故本實驗選擇乙醇浸提法制備植物提取物浸膏。利用溶劑法對乙醇浸提法所得浸膏分別用水、乙醇和乙酸乙酯進(jìn)行再一次分離，發(fā)現(xiàn)利用乙醇浸漬提

3、取后再利用乙醇溶劑分離提取的植物成分具有血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制活性，半抑制率(IC50)為13.4 mg/ml。 利用高效液相色譜(HPLC，C18色譜柱)進(jìn)行初步分離：流動相-采用梯度洗脫，A相為0.4％的磷酸緩沖液，B相為甲醇；流速：0.6ml/min；遇峰自動收集。記錄波長在220nm的色譜圖。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在11.57、13.02和13.35ml洗脫出的極性物質(zhì)具有體外血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑活性。 動物實驗選用二腎一夾型

4、(2K1C)腎血管性高血壓大鼠模型，按體重和血壓隨機(jī)分組，分別進(jìn)行單次給藥預(yù)實驗；單次給藥急性降壓實驗；進(jìn)行多次給藥降壓實驗。 預(yù)實驗及單次給藥急性降壓實驗結(jié)果都表明，給藥后2小時即有降壓作用，至12小時血壓降低仍較明顯。單次給藥急性降壓實驗中，中劑量的ACEI降壓作用較強(qiáng)，給藥后降壓效果都比較明顯(與給藥前比較p＜0.05)，平均降壓16.3 mmHg，且持續(xù)時間較長，達(dá)12小時；各組對心率的影響則不明顯。研究結(jié)果表明，本文在