雪旺細(xì)胞與成肌細(xì)胞混合移植治療肌營(yíng)養(yǎng)不良的研究.pdf

1、Duchenne型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是肌營(yíng)養(yǎng)不良中最常見(jiàn)的一種類型，是一種以骨骼肌進(jìn)行性變性、壞死為主要病理特征的X性連鎖隱性致死性遺傳肌病，是神經(jīng)系統(tǒng)三大遺傳病之一，由位于x染色體短臂的抗肌萎縮蛋白(dlystrophin，dys)基因缺陷引起的骨骼肌、心肌、平滑肌，甚至腦中神經(jīng)細(xì)胞的膜骨架蛋白缺乏所致。自Duchenne1868年首次描述此病后，人們對(duì)該病進(jìn)行了大量的研究，

2、并在DMD的基因診斷方面取得了一定的成果，但在DMD的治療上面始終無(wú)突破性進(jìn)展。主要包括成肌細(xì)胞移植、基因治療、干細(xì)胞移植等，上述治療方法各有利弊，但就安全性而言成肌細(xì)胞移植是治療DMD的較好選擇，但因成肌細(xì)胞移植后融合性低、表達(dá)時(shí)間短，影響其應(yīng)用。如何改進(jìn)移植技術(shù)，提高移植的成活率是目前急需解決的問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)采用雪旺細(xì)胞與成肌細(xì)胞局部混合注射方法來(lái)改善成肌細(xì)胞移植后的融合性。 目的：觀察雪旺細(xì)胞與成肌細(xì)胞局部混合移植治療DMD

3、模型鼠(mdx鼠)后骨骼肌的病理改變，dys和結(jié)蛋白的表達(dá)及成肌細(xì)胞與宿主的融合性情況。 方法： 1．成肌細(xì)胞和雪旺細(xì)胞的培養(yǎng)、純化、鑒定； 2．雪旺細(xì)胞與成肌細(xì)胞混合局部肌肉多點(diǎn)注射移植入Duchenne肌營(yíng)養(yǎng)不良模型鼠(mdx鼠)腓腸肌，每周一次，共四次。實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)過(guò)程中均給予免疫抑制劑(環(huán)孢菌素A)。 3．一個(gè)月后處死m(xù)dx鼠行進(jìn)行骨骼肌病理學(xué)及免疫組化學(xué)檢查，觀察骨骼肌病理改變，dys及結(jié)蛋白表

4、達(dá)情況，并采用圖像分析軟件分析圖片。 結(jié)果：混合注射組和單純注射組mdx鼠左側(cè)肢體dys和結(jié)蛋白的積分光密度(Integral optical density，IOD)值高于同組右側(cè)對(duì)照肢體，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)，混合移植組左側(cè)肢體dys的IOD值高于單純移植組左側(cè)肢體，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，兩組間左側(cè)肢體結(jié)蛋白的IOD值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：雪旺細(xì)胞與成肌細(xì)胞混合移植可提高成肌細(xì)胞移