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1、Duchenne型肌營養(yǎng)不良癥(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是肌營養(yǎng)不良中最常見的一種類型,是一種以骨骼肌進行性變性、壞死為主要病理特征的X性連鎖隱性致死性遺傳肌病,是神經(jīng)系統(tǒng)三大遺傳病之一,由位于x染色體短臂的抗肌萎縮蛋白(dlystrophin,dys)基因缺陷引起的骨骼肌、心肌、平滑肌,甚至腦中神經(jīng)細胞的膜骨架蛋白缺乏所致。自Duchenne1868年首次描述此病后,人們對該病進行了大量的研究,
2、并在DMD的基因診斷方面取得了一定的成果,但在DMD的治療上面始終無突破性進展。主要包括成肌細胞移植、基因治療、干細胞移植等,上述治療方法各有利弊,但就安全性而言成肌細胞移植是治療DMD的較好選擇,但因成肌細胞移植后融合性低、表達時間短,影響其應(yīng)用。如何改進移植技術(shù),提高移植的成活率是目前急需解決的問題。本實驗采用雪旺細胞與成肌細胞局部混合注射方法來改善成肌細胞移植后的融合性。 目的:觀察雪旺細胞與成肌細胞局部混合移植治療DMD
3、模型鼠(mdx鼠)后骨骼肌的病理改變,dys和結(jié)蛋白的表達及成肌細胞與宿主的融合性情況。 方法: 1.成肌細胞和雪旺細胞的培養(yǎng)、純化、鑒定; 2.雪旺細胞與成肌細胞混合局部肌肉多點注射移植入Duchenne肌營養(yǎng)不良模型鼠(mdx鼠)腓腸肌,每周一次,共四次。實驗前及實驗過程中均給予免疫抑制劑(環(huán)孢菌素A)。 3.一個月后處死m(xù)dx鼠行進行骨骼肌病理學(xué)及免疫組化學(xué)檢查,觀察骨骼肌病理改變,dys及結(jié)蛋白表
4、達情況,并采用圖像分析軟件分析圖片。 結(jié)果:混合注射組和單純注射組mdx鼠左側(cè)肢體dys和結(jié)蛋白的積分光密度(Integral optical density,IOD)值高于同組右側(cè)對照肢體,有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001),混合移植組左側(cè)肢體dys的IOD值高于單純移植組左側(cè)肢體,兩組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),兩組間左側(cè)肢體結(jié)蛋白的IOD值差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論:雪旺細胞與成肌細胞混合移植可提高成肌細胞移
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