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文檔簡介
1、目的:
觀察經(jīng)皮三叉神經(jīng)慢性電刺激(trigeminal nerve chronic stimulation,TCNS)對(duì)匹羅卡品誘導(dǎo)的慢性癲癇大鼠海馬和皮層內(nèi)囊泡型谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1(vesicular glutamate transporter1,VGLUT1)與囊泡型γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(vesicular GABA transporter,VGAT)表達(dá)的影響,探討三叉神經(jīng)電刺激治療癲癇的可能機(jī)制。
方法:
2、> 選用成年健康雄性SD大鼠150只,隨機(jī)選出100只建立匹羅卡品慢性癲癇模型,然后將達(dá)到癲癇持續(xù)狀態(tài)(Status epilepticus,SE)的實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為模型(Pilo)組和經(jīng)皮三叉神經(jīng)電刺激(TNS)組;正常對(duì)照(Control)組給予同劑量的生理鹽水代替匹羅卡品腹腔注射,隨后Control組和Pilo組均給予為期一個(gè)月的經(jīng)皮三叉神經(jīng)假性電刺激、TNS組給予為期一個(gè)月的真性電刺激。各組大鼠均于經(jīng)皮三叉神經(jīng)電刺激結(jié)束后24
3、h、72h、7d、14d、28d取材,通過免疫熒光雙標(biāo)和Western blot方法,分析海馬和皮層內(nèi)VGLUT1和VGAT的表達(dá)情況。所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,組間均數(shù)比較采用單因素方差(One-way ANOVA)分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.01為差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1.VGLUT1在海馬和皮層內(nèi)的表達(dá)
TNS組和Pilo組大鼠海馬、皮層內(nèi)VGLUT1的表達(dá)較
4、Control組均明顯增加,總體上均呈先升高后下降的趨勢(shì),約在72h左右達(dá)到高峰。在24h時(shí),TNS組大鼠海馬和皮層內(nèi)VGLUT1的表達(dá)均明顯高于Pilo組(P<0.01),而在以后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均低于Pilo組(P<0.01,P<0.05);TNS組大鼠海馬內(nèi)VGLUT1的表達(dá)量在28d時(shí)、皮層內(nèi)在14d和28d時(shí)與Control組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但與Pilo組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.
5、VGAT在海馬和皮層內(nèi)的表達(dá)
TNS組和Pilo組大鼠海馬、皮層內(nèi)VGAT的表達(dá)較Control組均明顯增加,在72h之前 VGAT的表達(dá)量逐漸增加,約在72h左右達(dá)到高峰,隨后開始下降。在72h時(shí),TNS組大鼠海馬和皮層內(nèi)VGAT的表達(dá)量均明顯低于Pilo組(P<0.01),而在24h、7d、14d、28d時(shí)均明顯高于Pilo組(P<0.01,P<0.05)。在28d時(shí),Pilo組大鼠海馬和皮層內(nèi) VGAT的表達(dá)量與 Con
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