mTOR信號途徑在兒童再生障礙性貧血T細(xì)胞中異?；罨某醪窖芯?pdf

1、目的：1.通過檢測再生障礙性貧血（AA）患兒T細(xì)胞內(nèi)mTOR信號途徑分子的表達(dá)水平，研究該信號途徑在兒童AA中的改變。2.通過檢測AA患兒T細(xì)胞內(nèi)調(diào)控因子GAS5的表達(dá)水平，初步探討GAS5與mTOR信號途徑的關(guān)系。3.從T細(xì)胞的胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑上，初步探討兒童AA的免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制。
　　方法：1.用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）方法檢測16例初治SAA及8例免疫抑制劑治療（IST）有效SAA患兒外周血CD3+T細(xì)胞內(nèi)mTOR信號途徑分子磷

2、酸化Akt（p-Akt）、磷酸化TSC2（p-TSC2）、磷酸化mTOR（p-mTOR）、磷酸化4EBP1（p-4EBP1）及磷酸化p70S6K（p-p70S6K）的表達(dá)水平。2.用實(shí)時(shí)定量聚合酶連反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測23例初治SAA及7例IST有效SAA患兒骨髓CD3+T細(xì)胞內(nèi)調(diào)控因子GAS5的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1.初治SAA組外周血CD3+T淋巴細(xì)胞內(nèi)p-Akt、p-TSC2、p-mTOR、p-4EBP1及p-p7

3、0S6K表達(dá)水平均明顯高于正常對照組（P＜0.05），而低于陽性對照CEM細(xì)胞株組（P＜0.05），初治SAA組、正常對照組及CEM組p-Akt的平均熒光強(qiáng)度（MFI）分別為（8.04±3.78）、（2.59±1.01）、（20.23±8.98），p-TSC2分別為（49.73±19.49）、（16.10±8.04）、（101.05±29.78），p-mTORC1分別為（13.90±9.32）、（2.92±1.09）、（34.3±19.

4、03），p-4EBP1分別為（142.69±53.36）、（26.91±13.70）、（256.01±53.79）， p-p70S6K分別為（17.67±10.48）、（3.69±2.22）、（31.73±12.85）。2.SAA治療有效組外周血CD3+T淋巴細(xì)胞內(nèi)p-Akt、p-TSC2、p-mTOR、p-4EBP1及p-p70S6K的表達(dá)水平均低于初治SAA組（P＜0.05）；SAA治療有效組p-Akt、p-TSC2、p-mTORC

5、1、p70S6K的表達(dá)水平與正常對照組無明顯差異（P均＞0.05），但p-4EBP1的表達(dá)水平高于正常對照組（P＜0.05），治療有效組信號途徑分子的表達(dá)量依次為（3.28±1.27）、（16.50±10.91）、（3.54±1.66）、（74.89±49.69）、（4.21±1.69）。3.初治SAA組骨髓CD3+T淋巴細(xì)胞內(nèi)GAS5的表達(dá)量明顯低于正常對照組（P＜0.05），而顯著高于CEM組（P＜0.05），三組GAS5的表達(dá)量分

6、別為（4.13±2.74）、（11.14±4.86）、（1.59±0.88）。4.治療有效組骨髓CD3+T淋巴細(xì)胞內(nèi)GAS5的表達(dá)水平高于初治SAA組（P＜0.05），而與正常對照組無明顯差異（P＞0.05），表達(dá)量為（8.92±3.53）。
　　結(jié)論：1.初治SAA患兒外周血T細(xì)胞中p-Akt、p-TSC2、p-mTOR、p-4EBP1、p-p70S6K表達(dá)升高，表明mTOR信號途徑在SAA患兒中呈活化狀態(tài)。2.SAA治療有效患