IGF-1對(duì)宮頸癌淋巴管生成的調(diào)控以及姜黃素的干預(yù)效應(yīng)研究.pdf

1、目的：研究IGF-1對(duì)宮頸癌淋巴管生成的的調(diào)控，觀察姜黃素(Curcumin，Cur)的干預(yù)效應(yīng)。
　　 方法：1. 運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)IGF-1 不同濃度、作用時(shí)間以及姜黃素干預(yù)下宮頸癌SiHa細(xì)胞中VEGF-C mRNA的表達(dá)。2. 建立宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移雞胚絨毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane，CAM)模型，運(yùn)用姜黃素干預(yù)，觀察移植瘤形成情況。應(yīng)用D2-40和VEGF-C 抗體免疫組

2、織化學(xué)染色(SP法)標(biāo)記淋巴管，觀測(cè)腫瘤微淋巴管生成情況，統(tǒng)計(jì)微淋巴管密度(lymphatic microvessel density，LMVD)及其面積百分比(lymphatic vessel area，LVA)進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：1.①宮頸癌SiHa細(xì)胞VEGF-C mRNA的表達(dá)隨IGF-1 濃度的遞增而變化，10ng/ml時(shí)達(dá)峰值。0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、50ng/ml組表達(dá)量依

3、次為對(duì)照組的1.34、1.67、3.14、5.28和3.02倍。②VEGF-C mRNA表達(dá)隨IGF-1 不同作用時(shí)點(diǎn)而變化，6h 達(dá)峰值。2h組、4h組、6h組和8h組的表達(dá)量分別為對(duì)照組的1.30、2.51、5.33和2.83倍。③分別加入IGF-1(10ng/ml)、Cur(10μm/ml)和Cur(20μm/ml)時(shí)，VEGF-C mRNA的表達(dá)量依次為對(duì)照組的5.51、0.72和0.21倍。④分別加入IGF-1(10ng/ml

4、)、IGF-1+Cur(10μm/ml)和IGF-1+Cur(20μm/ml)時(shí)，VEGF-CmRNA表達(dá)量依次為對(duì)照組的5.51、1.42和0.67倍。
　　 2. ①成功建立宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移CAM模型，最適細(xì)胞接種濃度為107/L，成瘤率達(dá)75％，接種后第5日達(dá)生長(zhǎng)高峰。②移植瘤組織切片HE染色可見癌細(xì)胞聚集成癌巢。免疫組化染色，可見移植瘤內(nèi)有微淋巴管形成。③對(duì)照組、IGF-1組、Cur組和IGF-1+Cur組的LMVD依次為