HaCaT細(xì)胞共培養(yǎng)法誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)角蛋白的研究.pdf

1、目的： 探討在體外培養(yǎng)的條件下HaCaT細(xì)胞誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(marrow mesenchymal stem cells，MSCs)表達(dá)角蛋白的可能性。 方法： 1.抽取健康大白兔骨髓，以密度梯度法分離純化MSCs。培養(yǎng)擴(kuò)增后，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD34，CD44，CD45鑒定細(xì)胞。 2.取第3代MSCs與HaCaT細(xì)胞以105:102個(gè)/ml種入培養(yǎng)瓶共培養(yǎng)，分別于3，7天，以胰酶差速消化分離MS

2、Cs和HaCaT，用免疫細(xì)胞法檢測(cè)角蛋白(Pan-cytokeratin，CK19)的表達(dá)。 結(jié)果： 1.原代培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在體外擴(kuò)增后，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示CD34、CD45陰性，CD44陽(yáng)性。 2.共培養(yǎng)3天、7天后分別行免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)，結(jié)果顯示Pan-CK和CK19均為陽(yáng)性。共培養(yǎng)3天的MSCs Pan-CK陽(yáng)性率(13.5±3.7％)顯著低于共培養(yǎng)7天的MSCs(29.1±8.3％)，共培養(yǎng)3