小菜蛾熱休克蛋白基因的克隆與mRNA熱激表達研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文是在本實驗室研究抗性和敏感性小菜蛾高溫(37℃)條件下適合度與其體內(nèi)Hsp70表達量關系的基礎之上，進一步利用分子生物學的相關知識，克隆小菜蛾hsp70基因片段并以此為模板合成探針進行Northern雜交，研究抗性和敏感性小菜蛾在高溫誘導下hsp70mRNA表達量之間的差異。本研究在登陸Genbank，BLAST昆蟲hsp70，選取保守區(qū)域利用Primer5.0軟件，設計了兩對引物，PCR產(chǎn)物純化后送Invitrogen公司進行TA

2、克隆后測序，主要研究結果如下： 1.在小菜的上下游區(qū)域分別克隆出一條600bp和680bp的片段，與其他昆蟲進行BLAST同源性比對，同源性在83％～86％之間。 2.克隆出的兩個片段中間有重復區(qū)域，接拼之后獲得長度為857bp小菜蛾hsp70的片段。與其他昆蟲進行BLAST同源性比對，同源性在84％～86％之間。故推測此序列為小菜蛾hsp70 mRNA的序列。 3.雜交結果表明：抗性和敏感性小菜蛾在常溫和37℃

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