強(qiáng)制性運(yùn)動(dòng)療法對(duì)大鼠腦缺血再灌注后神經(jīng)修復(fù)及Rho激酶表達(dá)的影響.pdf

1、目的：強(qiáng)制性運(yùn)動(dòng)療法(constraint-induced movement therapy,CIMT)廣泛地應(yīng)用于神經(jīng)康復(fù)領(lǐng)域，并被證實(shí)能夠有效地促進(jìn)肢體功能的恢復(fù)。應(yīng)用功能磁共振成像和經(jīng)顱磁刺激等方法發(fā)現(xiàn)，CIMT通過(guò)促進(jìn)腦功能重組而改善腦梗死患者的患肢功能。神經(jīng)系統(tǒng)具有很強(qiáng)的可塑性，而神經(jīng)再生是神經(jīng)可塑性的重要組成部分。腦梗死后康復(fù)訓(xùn)練能夠影響神經(jīng)再生，進(jìn)而對(duì)神經(jīng)功能恢復(fù)產(chǎn)生影響。神經(jīng)再生主要包括內(nèi)源神經(jīng)干細(xì)胞的激活與神經(jīng)元軸突的

2、再生，是腦梗死后功能恢復(fù)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。 中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的膠質(zhì)細(xì)胞生成的許多物質(zhì)，包括勿動(dòng)蛋白(Nogo)、髓鞘相關(guān)糖蛋白(myclin associated glucoprotein，MAG)、少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白(oligodendrocyte myelin glucoprotein，Omgp)，均能抑制受損神經(jīng)元軸突的再生。上述各種物質(zhì)是與Nogo受體結(jié)合后通過(guò)激活Rho激酶而發(fā)揮其抑制作用的。間質(zhì)細(xì)胞源性因子-1(stro

3、rnal cell-derived factor-1，SDF-1)是骨髓間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的CXC類(lèi)趨化蛋白。有研究發(fā)現(xiàn)腦缺血后的為期3周的CIMT使大鼠缺血側(cè)腦皮質(zhì)內(nèi)SDF-1蛋白的表達(dá)明顯上調(diào)，而且明顯地促進(jìn)了運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)。 SDF-1/CXCR4不僅能夠促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞的動(dòng)員、遷移和歸巢，而且還能夠通過(guò)抑制Rho激酶活性來(lái)促進(jìn)神經(jīng)元軸突延伸．從而推斷：腦缺血后CIMT有可能通過(guò)激活內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞及促進(jìn)神經(jīng)元軸突再生而改善神經(jīng)功能。然而

4、，目前國(guó)際上關(guān)于CIMT的研究大都采用影像學(xué)手段及行為學(xué)手段從功能角度進(jìn)行，很少有研究深入到細(xì)胞分子水平探討它對(duì)腦缺血后神經(jīng)再生的作用及相關(guān)機(jī)制。 為了驗(yàn)證上述假設(shè)，本研究應(yīng)用雌性Sprague-Dawley大鼠，研究CIMT對(duì)大鼠腦缺血再灌注(ischemia-reperfusion，I/R)后神經(jīng)功能恢復(fù)及Rho激酶表達(dá)的影響，從而為腦梗死的臨床治療提供新的理論基礎(chǔ)。 方法： 選擇健康雌性Sprague-Da

5、wley大鼠75只，將其隨機(jī)分為強(qiáng)制性運(yùn)動(dòng)療法組(CIMT組)25只，缺血再灌注組(I/R組)25只和假手術(shù)組(sham組)25只，CIMT組和I/R組制作成左側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血再灌注模型。3組大鼠再采用隨機(jī)區(qū)組法分為I/R后7d，14d，21d，28d，35d時(shí)處死組。CIMT組從I/R術(shù)后7d開(kāi)始進(jìn)行左前肢固定。3組大鼠在I/R術(shù)后第7d、14d、21d、28d、35d進(jìn)行Bedcrson評(píng)分、梯形平衡木試驗(yàn)、Morris水迷宮試驗(yàn)以

6、評(píng)價(jià)神經(jīng)功能缺損的恢復(fù)情況，并應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)缺血側(cè)大腦皮質(zhì)的Rho激酶表達(dá)水平。 結(jié)果： 1、CIMT對(duì)大鼠腦I/R后神經(jīng)功能缺損的影響 隨著缺血和強(qiáng)制性運(yùn)動(dòng)時(shí)間的延長(zhǎng)，兩組神經(jīng)功能缺損癥狀都逐漸減輕。與I/R組比較，在腦缺血再灌注術(shù)后14d和21d，CIMT組的肢體運(yùn)動(dòng)、平衡能力及學(xué)習(xí)記憶功能均明顯恢復(fù)(P<0.05)，28d和35d時(shí)兩組間神經(jīng)功能比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2、CI

7、MT對(duì)大鼠腦I/R后Rho激酶表達(dá)的影響 CIMT組大鼠的Rho激酶的表達(dá)水平在強(qiáng)制性運(yùn)動(dòng)后14d(腦缺血再灌注術(shù)后21d)時(shí)下降達(dá)最低水平，在強(qiáng)制性運(yùn)動(dòng)后28d(腦缺血再灌注術(shù)后35d)恢復(fù)到正常水平。I/R組在缺血再灌注術(shù)后14d時(shí)Rho激酶亦有所下降。兩組在腦缺血再灌注術(shù)后14d和21d的Rho激酶水平比較差異有顯著性意義(P<0.05)，CIMT組大鼠的Rho激酶顯著低于I/R組(P<0.05)，Rho激酶下降的持續(xù)時(shí)間