黃瓜綠斑駁花葉病毒全序列測(cè)定及其抗血清制備與應(yīng)用的研究.pdf

1、黃瓜綠斑駁花葉病毒（Cucumber green mottle mosaic virus，CGMMV）是侵染葫蘆科作物的重要病毒，近年來(lái)在我國(guó)多個(gè)省、市均有報(bào)道，嚴(yán)重威脅葫蘆科作物的生產(chǎn)。
　　本研究對(duì)浙江省采集的表現(xiàn)斑駁、花葉、畸形的甜瓜、西瓜和瓠瓜葉片樣品進(jìn)行RT-PCR鑒定，并通過(guò)分段擴(kuò)增測(cè)序的方法拼接獲得了來(lái)自甜瓜、西瓜和瓠瓜的3個(gè)CGMMV分離物基因組全序列。序列分析結(jié)果顯示:3個(gè)病毒分離物基因組全序列具有煙草花葉病毒屬

2、典型基因組結(jié)構(gòu)特征，全部由6423 nt構(gòu)成;3個(gè)全序列間的核苷酸同源性高達(dá)99.11-99.67％，編碼的外殼蛋白氨基酸同源性為100％。對(duì)所有已報(bào)道全序列的CGMMV分離物進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn)，CGMMV不同分離物形成2個(gè)進(jìn)化相關(guān)群體，3個(gè)浙江CGMMV分離物均位于第Ⅰ組內(nèi)，與已報(bào)道的中國(guó)CGMMV分離物和韓國(guó)CGMMV分離物親緣性較高。
　　為明確CGMMV在浙江、上海地區(qū)的發(fā)生、分布情況，本研究通過(guò)原核表達(dá)CGMMV CP

3、蛋白，制備了CGMMV CP抗血清，并應(yīng)用于浙江省和上海市葫蘆科作物疑似感病樣品的Dot-ELISA檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果表明，CGMMV在浙江省和上海市的葫蘆科作物上普遍存在，且瓠瓜、黃瓜、甜瓜和西瓜是其主要的寄主。在浙江省嘉善、海寧、紹興、臨安、慈溪地區(qū)都檢測(cè)到了CGMMV，且疑似樣品檢出率均在78％以上。在上海市只在奉賢區(qū)、金山區(qū)、青浦區(qū)、嘉定區(qū)檢測(cè)到CGMMV。
　　在CGMMV的防控方面，我們探索了基于amiRNA的CGMMV防