煤焦瀝青煙提取物對(duì)永生化人支氣管上皮細(xì)胞COX-2基因表達(dá)的誘導(dǎo)作用.pdf

1、背景：
　　 肺癌是我國乃至世界上最為常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率逐年升高，已經(jīng)成為城市惡性腫瘤中威脅最大的腫瘤類型。肺癌的治療效果得不到提高的原因主要是難以早期診斷，若可早期診斷和治療，則患者生存率可明顯上升。肺癌可能是由多種因素共同作用的結(jié)果，其中接觸工業(yè)致癌毒物在肺癌病因中占有一定的比重。煤焦瀝青（CoalTarPitch，CTP）是煤使用和工業(yè)煉焦過程中的副產(chǎn)品，為人類確切致癌物(G1)。環(huán)氧化酶-2(Cyclo

2、oxygenase-2，COX-2)在多種惡性腫瘤中存在高表達(dá)，與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，多種研究顯示COX-2是炎癥促癌的一種關(guān)鍵因子。
　　 目的：
　　 闡明CTPE對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞COX-2基因表達(dá)的影響;揭示CTPE誘導(dǎo)COX-2基因表達(dá)的分子生物學(xué)機(jī)制。
　　 方法：
　　 以人支氣管上皮細(xì)胞株（BEAS-2B）為體外模型。用RT-PCR法測(cè)定CTPE對(duì)COX-2mRNA表達(dá)水平的影

3、響。使用轉(zhuǎn)錄抑制劑放線菌素D對(duì)BEAS-2B細(xì)胞株作用，觀察CTPE對(duì)COX-2基因轉(zhuǎn)錄的影響。利用COX-2mRNA降解試驗(yàn)測(cè)定CTPE對(duì)轉(zhuǎn)錄后COX-2mRNA穩(wěn)定性的影響。利用三種特異性信號(hào)通路抑制劑預(yù)處理細(xì)胞株，來推測(cè)其對(duì)CTPE誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞COX-2mRNA表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。
　　 結(jié)果：
　　 CTPE刺激可致BEAS-2B細(xì)胞內(nèi)COX-2mRNA水平明顯升高，該作用呈時(shí)間(2～8h)及劑量(2～8μ

4、g/ml)依賴性(P=0.001)。用轉(zhuǎn)錄抑制劑放線菌素D(1μg/ml)預(yù)處理細(xì)胞30min，可明顯降低CTPE(2μg/ml，4h)對(duì)COX-2mRNA表達(dá)的誘導(dǎo)作用(P=0.001)，表明CTPE在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控COX-2基因表達(dá)。使用硫酸鋅刺激提高COX-2mRNA表達(dá)后，再使用放線菌素D終止COX-2mRNA合成的前提下，CTPE（2μg/ml）刺激可明顯減緩細(xì)胞內(nèi)COX-2mRNA的降解，表現(xiàn)為在不同時(shí)間點(diǎn)(0，2，4h)，C

5、TPE處理組COX-2mRNA水平均較相應(yīng)對(duì)照組（DMSO組）高（P值分別為0.001、0.002、0.001），說明CTPE對(duì)COX-2mRNA有穩(wěn)定作用。利用三種特異性細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路抑制劑預(yù)處理BEAS-2B細(xì)胞，均可明顯降低CTPE(2μg/ml，4h)對(duì)COX-2mRNA的誘導(dǎo)作用(P=0.001)，說明CTPE通過EGFR、PI3K和p38通路調(diào)節(jié)BEAS-2B細(xì)胞COX-2mRNA的表達(dá)過程。
　　 結(jié)論：