2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩64頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、腸炎沙門氏菌(Salmonella enteritidis,SE)是一類泛嗜性沙門氏菌,其不僅是危害養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展最為嚴(yán)重的病原之一,而且經(jīng)常以污染的家禽產(chǎn)品為載體危害人類健康。由fliC基因編碼的鞭毛蛋白是沙門氏菌重要的保護性抗原之一,可引起機體強烈的免疫應(yīng)答反應(yīng)。研究FliC蛋白的優(yōu)勢抗原區(qū)對沙門氏菌新型疫苗的研發(fā),進而減少人類食源性腸炎沙門氏菌的感染具有重要意義。
  本研究利用DNaseⅠ將SE的fliC基因隨機酶切成100-

2、500 bp的DNA小片段,將這些片段插入到酵母表面展示載體pCTCON-2中,并將其轉(zhuǎn)入大腸桿菌中構(gòu)建酵母隨機展示文庫pCTCON-fliC-Lib,其庫容量大小約為2.7×105。通過基因測序確定文庫pCTCON-fliC-Lib的隨機性和插入片段的大小,結(jié)果顯示隨機挑取的50個克隆中的所有片段插入方向都是隨機的,這些片段的大小在100-500 bp范圍內(nèi),其分布能夠覆蓋整個fliC基因。
  將酵母展示文庫pCTCON-fl

3、iC-Lib電擊轉(zhuǎn)入釀酒酵母EBY-100菌株中誘導(dǎo)表達(dá)。用SM6陽性血清染誘導(dǎo)表達(dá)的FliC文庫pCTCON-fliC-Lib,通過流式細(xì)胞儀分選陽性酵母,經(jīng)兩輪分選后,提取陽性酵母的質(zhì)粒進行基因測序分析。結(jié)果顯示SM6的FliC蛋白的抗原區(qū)位于D1區(qū)(1-201位氨基酸)、D2區(qū)(202-352位氨基酸)和D4區(qū)(394-505位氨基酸),非抗原區(qū)位于D3區(qū)(353-393位氨基酸)。
  將FliC蛋白的4個區(qū)域進行酵母表面

4、展示表達(dá)并通過流式分析4個區(qū)域的抗原特性;同時4個區(qū)域進行原核表達(dá)并通過ELISA分析其抗原特性。流式分析和ELISA分析結(jié)果顯示FliC蛋白的4個區(qū)域中,D1區(qū)和D2區(qū)為主抗原區(qū),D4區(qū)為次抗原區(qū),D3區(qū)為非抗原區(qū)。通過雞群免疫FliC蛋白的各個抗原區(qū)分析各抗原區(qū)在雞體內(nèi)的功能,結(jié)果表明FliC蛋白的D1區(qū)、D2區(qū)、D4區(qū)均能降低SM6在雞體內(nèi)的定植。
  本研究利用酵母表面展示技術(shù)將構(gòu)建的腸炎沙門氏菌SM6菌株的FliC蛋白抗

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論