殼聚糖及其衍生物微球的制備以及作為介入治療材料的基礎(chǔ)研究.pdf

1、殼聚糖(chitosan)是甲殼素的脫乙?；a(chǎn)物，化學(xué)名稱(chēng)為β-(1,4)-2-乙酰氨基-2-脫氧-D-葡聚糖，是一種天然可生物降解的陽(yáng)離子多糖，具有良好的物理化學(xué)特性和生物相容性，作為生物醫(yī)學(xué)材料已經(jīng)被逐漸應(yīng)用于人工皮膚、人工骨骼、人工血管、手術(shù)縫合線、腫瘤治療、藥物緩釋和基因轉(zhuǎn)導(dǎo)等領(lǐng)域。本文對(duì)殼聚糖的理化性質(zhì)以及基于殼聚糖微球的制備和各種性能進(jìn)行初步研究，以篩選合適的微球進(jìn)行下一步腫瘤介入治療及臨床等實(shí)驗(yàn)研究。 采用酸降解法

2、以及乙酰化方法制備了不同分子量(MW,1370kDa-60kDa)和不同脫乙酰度(DD，94.6％-73.3％)的殼聚糖樣品。利用兩種模式即改進(jìn)型HeraderSol-Hasselbalch方程(MHHM)和H6gfeldt三參數(shù)方程(HTPM)分析其解離平衡常數(shù)(pK)，研究MW和DD對(duì)pK影響。結(jié)果表明，殼聚糖的MW對(duì)其pK．基本上沒(méi)有影響；而DD對(duì)殼聚糖pk的影響較大，殼聚糖的DD從94.6％降到73.3％時(shí)，其pK從6.17升高

3、到6.84。在給定的殼聚糖樣品范圍內(nèi)，兩種模式都能很好的擬合樣品的滴定曲線，相比較而言，HTTP模式更適合解釋殼聚糖的PK。 采用乳化交聯(lián)法成功制備了殼聚糖微球(CM)，并對(duì)其表面乙酰化修飾成功制得乙?；瘹ぞ厶俏⑶?ACM)；另將殼聚糖樣品羧甲基化之后再利用乳化法成功制備出羧甲基殼聚糖微球(CMCM)。以光學(xué)顯微鏡和電子掃描顯微鏡觀察三種微球的形態(tài)和大小，結(jié)果表明，ACM、CM和CMCM都具有球形圓整、表面光滑、分散性、流動(dòng)性、

4、懸浮性好等特點(diǎn)。ACM、CM和CMCM的平均粒徑分別為116.4um、117.9um和54.1um。電位滴定法和紅外光譜法測(cè)定證實(shí)微球的結(jié)構(gòu)組成發(fā)生明顯變化。CM表面主要的功能基團(tuán)是帶有正電荷的氨基基團(tuán)，ACM則主要帶有疏水性的乙?；?，CMCM的表面同時(shí)帶有負(fù)電荷的羧基基團(tuán)和帶有正電荷的氨基基團(tuán)，這種結(jié)構(gòu)上的變化給微球的生物學(xué)特性帶來(lái)了巨大的變化。 溶脹性研究表明，CM和CMCM的溶脹受溶劑、pH以及離子強(qiáng)度的影響較大，而ACM

5、的溶脹則幾乎不受溶液中pH的影響；血液相容性研究表明，ACM具有良好的血液相容性，它能降低對(duì)血小板的吸附，表面不能吸附紅細(xì)胞，不會(huì)引起凝血時(shí)間縮短；蛋白吸附實(shí)驗(yàn)表明ACM對(duì)血漿蛋白的吸附明顯降低；ACM具有很好的細(xì)胞相容性。在PBS中，ACM能被溶菌酶所降解，8個(gè)星期之后就有60％被降解；體外抑菌實(shí)驗(yàn)表明，ACM在較高濃度時(shí)對(duì)酵母菌有抑制作用，而在低濃度時(shí)卻沒(méi)有抑制作用；ACM還能包載較高濃度的硫酸鋇。以上實(shí)驗(yàn)表明，ACM能夠符合作為栓