恩諾沙星與洛克沙胂對豬與兔肝微粒體細胞色素P450酶蛋白表達的影響.pdf

1、細胞色素 P450（Cytochrome P450，CYP450，P450）是一類參與機體內(nèi)、外源化合物代謝的血紅蛋白酶類。CYP450在藥物代謝中起著非常重要的作用，同時很多藥物能夠對 CYP450產(chǎn)生影響，起誘導或抑制作用，從而影響自身或其他類似藥物的代謝。CYP450在維持動物機體的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，揭示藥物代謝機理與藥物之間相互作用，以及指導臨床合理用藥等方面都有著非常重要的意義。
　　恩諾沙星是動物專用的第三代氟喹諾酮類抗生素

2、。因其抗菌能力強、抗菌譜廣而廣泛應用于獸醫(yī)臨床與畜牧業(yè)生產(chǎn)中。洛克沙胂為有機砷制劑，用于防治畜禽的細菌感染，并有促生長作用。這兩種藥物在很多情況下會聯(lián)合使用，因此研究兩者以及兩者的聯(lián)合用藥對CYP450的影響具有重要的實際意義。豬、兔既是人重要的肉食來源，也用于實驗動物，因此本研究具有重要意義。
　　本論文以豬和兔作為對象，分別從體外和體內(nèi)兩方面研究恩諾沙星（EF）、洛克沙胂（ROX），以及二者的聯(lián)合使用對豬和兔的肝微粒CYP45

3、0酶系蛋白表達的影響。
　　EF、ROX單用體外試驗方法：將不同濃度的EF和ROX分別添加到豬和兔的肝微粒體體外孵育體系中，并設對照組，置于37℃水浴中1 h。采用Western Blotting檢測肝微粒體中CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1的蛋白表達。EF和ROX聯(lián)合用藥體外試驗方法：將含有EF和ROX各5 mmol·L-1的體外孵育體系于37℃水浴中1 h，以Western Blotting檢測CYP3A4、CYP1A

4、2、CYP2E1的蛋白表達。
　　EF、ROX單用以及兩者聯(lián)合用藥的體內(nèi)試驗方法：肌肉注射EF5 mg·kg-1·BW-1，飼喂含ROX50 mg·t-1的飼料。EF組的豬和兔分別注射EF；ROX組飼喂僅含ROX的飼料；聯(lián)合用藥組則是既注射EF，同時飼喂 ROX的飼料；同時設對照組。提取肝微粒體，以 Western Blotting檢測CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1蛋白表達。
　　豬體外 EF和ROX單用結果表明，

5、低、中、高濃度的EF對CYP3A4酶蛋白表達有顯著抑制作用（P<0.01）；而低濃度 ROX對CYP3A4酶蛋白表達無顯著性影響（P>0.05），中、高濃度的ROX則對其有明顯抑制作用（P<0.01）。低、中濃度的EF和ROX對CYP1A2酶蛋白表達均無顯著性作用（P>0.05），高濃度則是抑制作用（P<0.01）。低、中濃度對 CYP2E1酶的蛋白表達沒有影響（P>0.05），而高濃度EF則對其有明顯抑制作用（P<0.01）；低濃度

6、ROX對 CYP2E1酶的蛋白表達無影響（P>0.05）；中、高濃度則有明顯抑制作用（P<0.01）。
　　兔體外 EF和ROX單用結果表明，低、中濃度 EF對 CYP3A4酶蛋白表達沒有顯著的影響（P>0.05），高濃度是明顯抑制作用（P<0.01）；低濃度 ROX對 CYP3A4酶蛋白表達無顯著差異（P>0.05），而中、高濃度 ROX則有明顯的抑制作用（P<0.01）。低、中濃度 EF對于兔CYP1A2蛋白表達均沒有顯著作用

7、（P>0.05）；高濃度則有明顯抑制作用（P<0.01）。低濃度ROX對兔CYP1A2蛋白表達無顯著差異（P>0.05）；中、高濃度則是抑制作用（P<0.01）。低濃度的EF和ROX對CYP2E1酶蛋白表達無顯著差異（P>0.05），而中、高濃度 EF和ROX對CYP2E1酶蛋白表達有明顯抑制作用（P<0.01）。
　　EF和ROX的體外聯(lián)合用藥與對照組相比對豬和兔肝微粒體的CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1酶的蛋白表達均有

8、顯著性抑制作用（P<0.01）。并且與 EF和ROX單獨用藥組相比均有極顯著的抑制作用（P<0.01）。
　　豬體內(nèi)試驗結果顯示，EF對CYP3A4和CYP2E1酶的蛋白表達具有抑制作用（P<0.01），對CYP1A2則具有誘導作用（P<0.01）；ROX則對 CYP3A4差異不顯著（P>0.05），但能誘導 CYP1A2和CYP2E1蛋白表達（P<0.01）。
　　兔體內(nèi)試驗結果顯示，EF能顯著誘導 CYP3A4的蛋白表達

9、（P<0.01），抑制CYP1A2的表達（P<0.01），但對CYP2E1差異不顯著（P>0.05）。ROX能誘導 CYP3A4和CYP2E1的蛋白表達，但對CYP1A2則是抑制作用（P<0.01）。
　　在體內(nèi)試驗中，EF和ROX聯(lián)合用藥對豬和兔的CYP3A4、CYP1A2和CYP2E1的蛋白表達較對照組均有極顯著抑制作用（P<0.01）。并且對CYP3A4、CYP2E1的抑制效應與EF和ROX單用藥相比，也有極顯著抑制作用。對