羥基喜樹堿對人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞NF-κB的表達(dá)影響.pdf

1、病理性瘢痕嚴(yán)重影響美觀、功能，降低患者生活質(zhì)量，因此科研工作者長期以來試圖采用多種辦法治療病理性瘢痕，包括藥物、手術(shù)、壓力、放射等等，但仍未取得滿意的療效。我們實(shí)驗(yàn)組致力于尋找比較滿意的防治辦法，在前期研究基礎(chǔ)上，繼續(xù)探索羥基喜樹堿對另一轉(zhuǎn)導(dǎo)通路NF-kB的影響。
　　 目的：
　　 擬通過羥基喜樹堿(hydroxycamptothecin，HCPT)對人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞(hypertrophicscar fibro

2、blasts HSFB)進(jìn)行培養(yǎng)干預(yù)，檢測成纖維細(xì)胞NF-kBp65、I k Bα mRNA及蛋白表達(dá)，以期了解羥基喜樹堿在增生性瘢痕成纖維細(xì)胞中對NF-k B轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。
　　 方法：
　　 標(biāo)本取自我院整形科患者(傷后5月)，采用組織塊和組織塊消化培養(yǎng)法，體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞第4-8代后，分為4組，空白對照組，加入成纖維細(xì)胞無血清培養(yǎng)基；實(shí)驗(yàn)組：加入含有成不同濃度羥基喜樹堿(125、250、500ng/ml)無血清

3、培養(yǎng)基作用培養(yǎng)24小時(shí)。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR法)檢測NF-k B p65、I k Bα mRNA表達(dá)，蛋白印跡法(Western-blot)法檢測NF-k B p65、I k Bα蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1、各濃度羥基喜樹堿作用24小時(shí)后NF-k B p65、I k Bα mRNA表達(dá)灰度比值為：500 ng/ml組(0.790±0.038、0.664±0.086)，250 ng/ml組(0.5

4、62±0.051、0.762±0.067)，125 ng/ml組(0.268±0.032、0.870±0.051)，空白組(0.104±0.032，0.974±0.039)，各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；NF-k B p65、I k Bα mRNA灰度比值兩兩比較也有差異(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，各濃度(125、250、500ng/mL)羥基喜樹堿作用后增生性瘢痕成纖維細(xì)胞NF-k B p65mRNA表達(dá)升高、I k Bα

5、 mRNA表達(dá)降低。
　　 2、各濃度羥基喜樹堿作用24小時(shí)后NF-k B p65、I k Bα蛋白表達(dá)灰度比值為：500 ng/ml組(0.765±0.023、0.555±0.021)，250 ng/ml組(0.593±0.015、0.736±0.016)，125 ng/ml組(0.455±0.012、1.060±0.033)，空白組(0.314±0.016，1.093±0.021)，各組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；蛋白