大黃酸對(duì)轉(zhuǎn)化生長因子β-,1-誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化及核因子κB活性的影響.pdf

1、目的 探討大黃酸(Rhein)對(duì)轉(zhuǎn)化生長因子B<,1>(TGF-B<,1>)誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化(EMT)的作用及其對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子кB (nuclear factor kappa B，NF-кB)表達(dá)的影響。 方法 以人類腎臟近曲小管上皮細(xì)胞株(Human Kidney Cell，HK-2)為研究對(duì)象，體外培養(yǎng)細(xì)胞后實(shí)驗(yàn)分組如下：①陰性對(duì)照組；②TGF-B<,1>(8ng/ml)組；③大黃酸(4、8、16ug

2、/ml)組；④大黃酸(4、8、16ug/ml)+TGF-B<,1>(8ng/ml)組。應(yīng)用相差顯微鏡、電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)變化，間接免疫熒光檢測細(xì)胞標(biāo)記蛋白CK-8、a-SMA 變化及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法 (RT-PCR) 方法檢測 HK-2 細(xì)胞NF-кBmRNA含量的變化。 結(jié)果 大黃酸(4、8、16ug/ml)+TGF-B<,1>組比TGF-B<,1>組誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞角蛋白表達(dá)有所增強(qiáng)，a平滑肌肌動(dòng)蛋白(

3、a smooth muscle actin，a-SMA)的表達(dá)比TGF-B<,1>組減弱，同時(shí)HK-2細(xì)胞NF-кBmRNA的含量比TGF-B<,1>組減少(p<0.05)，大黃酸使TGF-B<,1>誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞NF-кB的活性明顯下降(p<0.05)。 結(jié)論 ①大黃酸可在一定濃度范圍內(nèi)抑制 TGF-B<,1>誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化及TGF-B<,1>誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞NF-кB的表達(dá)。②大黃酸抑制TG