聯(lián)合阻斷mTOR和ERK-MAPK信號(hào)通路抑制結(jié)節(jié)硬化癥細(xì)胞增殖.pdf

1、結(jié)節(jié)硬化癥(Tuberous Sclerosis Complex，TSC)是以多器官組織缺陷和錯(cuò)構(gòu)瘤為特征的系統(tǒng)性腫瘤綜合癥。由于至今尚無(wú)有效的治療方法，此病最終可導(dǎo)致病人嚴(yán)重癡呆、腎功能衰竭、呼吸衰竭以至死亡。結(jié)節(jié)硬化癥是由于抑癌基因TSC1或TSC2突變引起的常染色體顯性遺傳病，根據(jù)TSC基因定位的不同，可將結(jié)節(jié)性硬化癥分為T(mén)SC1型與TSC2型。但臨床上大部分是TSC2突變型。TSC1/TSC2蛋白復(fù)合物的功能喪失激活了蛋白激酶m

2、TOR(mammalian target of rapamycin)，從而導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的失控。雷帕霉素(rapamycin)是一種mTOR蛋白抑制劑，是目前臨床上比較有潛力的治療結(jié)節(jié)性硬化癥的藥物。但最近的研究表明通過(guò)抑制mTOR治療結(jié)節(jié)硬化癥的臨床療效不明顯，并且有耐藥病例的出現(xiàn)。我們推測(cè)抑制mTOR除解除了對(duì)RTK/PI3K/AKT信號(hào)級(jí)聯(lián)的反饋抑制作用以外，也消除了最新發(fā)現(xiàn)的mTOR對(duì)ERK/MAPK信號(hào)通路的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，這

3、些作用都降低了mTOR抑制劑的療效。即抑制mTOR的同時(shí)會(huì)相應(yīng)地解除mTOR對(duì)ERK/MAPK信號(hào)通路的負(fù)反饋抑制作用，從而活化ERK/MAPK信號(hào)通路。因此我們提出聯(lián)合抑制mTOR和ERK/MAPK通路用藥會(huì)彌補(bǔ)mTOR抑制劑單獨(dú)用藥的不足，從而增強(qiáng)結(jié)節(jié)硬化癥病人的臨床療效。我們使用廣泛應(yīng)用的TSC基因敲除的小鼠細(xì)胞模型(Tsc—/—小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)來(lái)驗(yàn)證我們的假設(shè)。實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)mTOR的抑制劑rapamycin可以負(fù)反饋激活

4、ERK/MAPK通路，這同之前的報(bào)道相一致；ERK/MAPK通路中MEK1/2的抑制劑PD98059可削弱因rapamycin導(dǎo)致的ERK/MAPK通路活化作用；rapamycin及PD98059在此細(xì)胞模型中是以相加而非協(xié)同的方式相互作用；聯(lián)合應(yīng)用rapamycin和PD98059可更有效地抑制Tsc2基因敲除成纖維細(xì)胞的增殖。因此我們提出，聯(lián)合抑制mTOR和ERK/MAPK信號(hào)通路將會(huì)比單一抑制用藥更好的治療結(jié)節(jié)硬化癥。這一方法很可