結(jié)節(jié)性硬化癥的臨床與實驗研究.pdf

1、第一部分結(jié)節(jié)性硬化癥的皮膚表現(xiàn)和內(nèi)臟病變 背景：結(jié)節(jié)性硬化癥(tuberoussclerosiscomplex，TS或TSC)是一種少見的常染色體顯性遺傳性疾病，臨床表現(xiàn)多種多樣，腦、腎、心、肺等重要內(nèi)臟病變是TS主要死亡原因。目的：為了熟悉TS的特征性皮膚表現(xiàn)和常見的皮膚外病變，以便早期正確診斷本病并及早發(fā)現(xiàn)重要內(nèi)臟器官的病變。 方法：對78例TS患者進行了詳細的病史詢問、體格檢查包括皮膚科檢查、頭顱CT和MRI、腹部

2、B超、胸部X線、手足X線及眼科檢查。 結(jié)果：TS常累及皮膚、腦、腎等器官；皮膚表現(xiàn)中色素減退斑最常見、最早出現(xiàn)，81．5％患者數(shù)目超過3個；其次常見的是面部血管纖維瘤和鯊革樣斑；前額纖維斑塊、面部血管纖維瘤和鯊革樣斑平均發(fā)生年齡分別為2．6、6．0、8．1歲；TS患者頭顱CT檢查陽性率高。本病容易誤診或漏診為某一器官病變?nèi)缃Y(jié)締組織痣、室管膜下巨細胞星形細胞瘤、腎臟血管平滑肌脂肪瘤、癲癇。 結(jié)論：識別特征性的皮膚表現(xiàn)有助于

3、TS早期診斷，建議臨床醫(yī)師對色素減退斑提高警惕尤其是伴有癲癇的患者或者在嬰兒期其數(shù)目超過3個者：頭顱CTN本病有很高的診斷價值：TS明確診斷后應注意患者腦、腎臟等內(nèi)臟病變的檢查和隨訪。對診斷為腰骶部的結(jié)締組織痣或側(cè)腦室室管膜下巨細胞星形細胞瘤或雙側(cè)腎臟血管平滑肌脂肪瘤的患者應想到這些與本病關(guān)系較密切，應進一步檢查尋找本病的其他證據(jù)。 第二部分結(jié)節(jié)性硬化癥相關(guān)的各臟器損害的病理和免疫組化研究 背景：結(jié)節(jié)性硬化癥(TS)足一

4、種常染色體顯性遺傳的以多器官錯構(gòu)瘤為特征的神經(jīng)皮膚綜合癥，臨床表現(xiàn)多種多樣，病變可涉及三胚層來源的器官。目的：了解TS各臟器損害的病理特征以及各臟器腫瘤是否有共同的細胞來源。 方法：觀察了確診為結(jié)節(jié)性硬化癥的33例患者各臟器損害(包括皮膚損害20例、腦腫瘤10例、腎臟腫瘤2例、上頜竇腫瘤1例)的病理特點，并采用ABC法進行了GFAP(glia1fibrillaryacidicprotein，神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白)、S-100、NF(

5、neurofilamentprotein，神經(jīng)絲蛋白)、Syn(synaptophysin，突觸素)、HMB-45、CD34免疫組化分析。采用weigert法染色觀察了20例皮膚損害(8例面部血管纖維瘤、10例鯊革樣斑和2例前額纖維斑塊)的彈力纖維。部分腫瘤還做了SMA(smoothmuscleactin，平滑肌肌動蛋白)、CK(cytokeratin，細胞角蛋白)、EMA(epitheliaimembraneantigen，細胞膜抗原

6、)、VIM(vimetin，波形蛋白)免疫組化分析。 結(jié)果： 1．10例腦腫瘤均為室管膜下巨細胞星形細胞瘤，2例腎臟腫瘤為血管平滑肌脂肪瘤，1例上頜竇腫瘤為促結(jié)締組織增生性纖維瘤樣腫瘤。 2．腦、腎臟、皮膚、上頜竇各臟器腫瘤損害中CD34均為強陽性。 3．面部血管纖維瘤、鯊革樣斑和前額纖維斑塊中均見膠原纖維增殖，彈力纖維減少。 4．腦部的室管膜下巨細胞星形細胞瘤GFAP、S-100、Syn、NF均

7、有不同程度表達，而在皮膚損害、上頜竇腫瘤中均沒有表達。腎臟腫瘤中GFAP、Syn、NF均陰性，部分脂肪細胞中S-100陽性。 5．HMB-45在腎臟血管平滑肌脂肪瘤的平滑肌細胞中陽性，腦部的室管膜下巨細胞星形細胞瘤瘤細胞有部分表達，而在皮膚損害和上頜竇腫瘤中沒有表達。 結(jié)論： 1．TS的腦、腎臟、皮膚、上頜竇各臟器腫瘤各有自己的病理特點和免疫表型。 2．TS的腦、腎臟、皮膚、上頜竇各臟器腫瘤中血管豐富。

8、 3．TS各種常見的皮膚損害中膠原纖維增殖，彈力纖維減少。 4．TS腦部的室管膜下巨細胞星形細胞瘤瘤細胞兼有神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)的免疫表型，具有多向分化的能力。 第三部分TS的鯊革樣斑與不伴有TS的結(jié)締組織痣的區(qū)別 目的：了解Ts的鯊革樣斑與不伴有TS的結(jié)締組織痣有無異同。 方法：對10例TS的鯊革樣斑和5例不伴有TS的結(jié)締組織痣分別進行了組織病理學觀察，并采用Weigert法彈力纖維染色和ABC法進行

9、了GF^P、S-100、NF、Syn、HMB-45、CD34免疫組化分析。 結(jié)果：臨床上鯊革樣斑多發(fā)，結(jié)締組織痣一般單發(fā)。HE染色中TS鯊革樣斑和結(jié)締組織痣均可見膠原增加，后者還可見少量脂肪組織異位，穿插在增殖的膠原纖維中，而這在鯊革樣斑中未見有此現(xiàn)象；彈力纖維染色中TS鯊革樣斑的彈力纖維在真皮淺層明顯減少，而結(jié)締組織痣彈力纖維正常、增多或減少，減少時拿層均勻一致。兩者的免疫組化分析顯示病變組織區(qū)GFAP、S-100、Syn、N

10、F、HMB-45均沒有表達，CD34標記的血管都很豐富。 結(jié)論：雖然TS的鯊革樣斑與不伴TS的結(jié)締組織痣有不少相同的地方，但兩者有區(qū)別，彈力纖維染色染色可以幫助鑒別診斷。 第四部分結(jié)節(jié)性硬化癥TSCl基因突變的檢測 目的：分析TS患者中TSCl基因15、17、18號外顯子的突變情況。 方法：采用聚合酶鏈反應一變性高效液相色譜(polymerasechainreactiondenaturinghighper

11、formanceliquidchromatography，PCR-DHPLC)技術(shù)分析了32例患者和其父母的外周~TSCi基因15、17、18號外顯子突變情況。 結(jié)果：DHPLC洗脫曲線發(fā)現(xiàn)一個患者TSCi基因的18號外顯子異常峰型，進一步測序發(fā)現(xiàn)18號外顯子上2285A→G突變(762N→S)，患者的父親也有此突變，但臨床上只有色素減退斑和咖啡斑，母親和正常人群中未見此突變。 結(jié)論：采用PCR-DHPLC結(jié)合測序的方法