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文檔簡介
1、目的:應用同位素標記相對和絕對定量技術(iTRAQ)結(jié)合二維液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(2D LC-MS/MS)篩選精索靜脈曲張(varicocele,VC)不育患者和正常生育男性差異表達蛋白,探討VC導致男性不育的可能分子機制。
方法:收集左側(cè)VC不育患者(II度或III度)精液標本10份為實驗組,正常生育男性精液標本10份作對照組。精漿樣本iTRAQ標記后(117標記VC不育組,114標記正常生育對照組)進行2D LC-MS/
2、MS分析。采用Proteome Discoverer1.3軟件對質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行分析,差異表達蛋白上下調(diào)倍數(shù)≥1.3,P≤0.05為差異有統(tǒng)計學意義。所得差異表達蛋白進行生物信息學分析。
結(jié)果:共鑒定出1100種蛋白。相對于正常生育組,VC不育組差異表達蛋白共89個,其中上調(diào)蛋白45個,下調(diào)44個?;虮倔w論(Gene ontology,GO)分析表明,這些差異表達蛋白的生物學過程主要富集分布于:損傷反應、防御反應、炎性反應、急性
3、炎性反應、急性時相反應。與精子發(fā)生及生殖相關蛋白共3個,分別為:zona pellucida-binding protein1 isoform2 precursor,phosphoglycerate kinase2(PGK2),semenogelin-1 preproprotein。
結(jié)論:精索靜脈曲張對男性生育的影響可以通過精漿中蛋白的表達變化體現(xiàn)出來,這些差異蛋白參與的復雜的生物學過程如損傷反應、炎性反應等綜合作用導致了男
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