miR-135a在骨髓增生異常綜合征和急性髓系白血病中的表達(dá)及其與c-myc關(guān)系的分析.pdf

1、研究目的：骨髓增生異常綜合征（myelodysplastic syndromes, MDS）是起源于造血干細(xì)胞的一組異質(zhì)性髓系克隆性疾病，特點(diǎn)是髓系細(xì)胞分化及發(fā)育異常，表現(xiàn)為無效造血、難治性血細(xì)胞減少、造血功能衰竭，高風(fēng)險(xiǎn)向急性髓系白血?。╝cute myelocytic leukemia，AML）轉(zhuǎn)化。急性髓系白血病是一類造血干/祖細(xì)胞惡性克隆性疾病，造血干/祖細(xì)胞因增殖失控、分化障礙、凋亡受阻，而停滯在細(xì)胞發(fā)育的不同階段。MDS和A

2、ML的發(fā)病是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，其過程涉及多步驟、多因素的參與。諸多研究表明微小RNA（MicroRNA，miRNA）miR-135a參與了多種疾病的發(fā)生、發(fā)展；c-myc是被研究最廣泛的癌基因之一，其同樣在MDS和AML中高表達(dá)，有研究表明c-myc是miR-135a的靶基因，為此我們研究了miR-135a在MDS和AML患者中的表達(dá)，并應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測c-myc蛋白的表達(dá)，探討這二者在MDS和AML的臨床意義、分析miR-1

3、35a與c-myc之間的關(guān)聯(lián)性。
　　研究方法：
　　1、研究對象：2013年1月至2014年2月福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院血液科42例急性髓系白血?。ǚ荕3）患者、19例骨髓增生異常綜合征患者及16例異基因造血干細(xì)胞移植供者作為正常對照。AML初治患者其中男性25例，女性17例，年齡16-80歲，中位年齡48.5歲；19例MDS患者其中男性11例，女性8例，年齡27-74歲，中位年齡59歲。
　　2、收集研究對象骨髓單

4、個(gè)核細(xì)胞，提取總RNA并逆轉(zhuǎn)錄，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（Realtime qPCR）對骨髓血單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行miR-135a基因表達(dá)檢測，同時(shí)以U6為內(nèi)參照。并收集其中27例AML和16例MDS患者骨髓組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)方法檢測c-myc蛋白的表達(dá),統(tǒng)計(jì)學(xué)分析c-myc與miR-135a之間的關(guān)系。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.miR-135a在骨髓增生異常綜合征和急性髓系白血病中的表達(dá)與正常對照組相比顯著低表達(dá)。骨

5、髓增生異常綜合征和急性髓系白血病兩組間miR-135a表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2.在AML組和MDS組中miR-135a的表達(dá)與年齡、性別、白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)、疾病分型、染色體異常均無明顯相關(guān)性。
　　3.C-myc蛋白表達(dá)定位于細(xì)胞核，在AML和MDS中c-myc與miR-135a的表達(dá)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)相關(guān)性。
　　結(jié)論：miR-135a基因在AML及MDS患者中低表達(dá)，可能在MDS和AML的發(fā)病中起了重要作用