白術(shù)內(nèi)酯I對MyD88+卵巢癌細(xì)胞的吲哚胺-2,3雙加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase IDO)的表達(dá)及外周血T淋巴細(xì)胞增殖活性的影響.pdf

1、研究目的:
　　研究白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對人MyD88+卵巢癌細(xì)胞中吲哚胺-2,3雙加氧酶（indoleamine-2,3-dioxygenase IDO）蛋白表達(dá)水平的影響。研究人MyD88+卵巢癌細(xì)胞與健康人外周血T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)后，白術(shù)內(nèi)酯I對T淋巴細(xì)胞增殖活性的影響。
　　研究方法:
　　本研究采用Western Blot法：檢測白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對MyD88+人卵巢癌細(xì)胞中吲哚胺-2,3雙加氧酶（indoleamine-2,3

2、-dioxygenase IDO）蛋白表達(dá)水平的影響。應(yīng)用MTT比色法：檢測MyD88+卵巢癌細(xì)胞與健康人外周血T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)后，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對T淋巴細(xì)胞增殖活性的影響。
　　研究結(jié)果:
　　1、人 MyD88+卵巢癌細(xì)胞株中存在吲哚胺-2,3雙加氧酶（indoleamine-2,3-dioxygenase IDO）蛋白的高表達(dá)。
　　2、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ能夠抑制人MyD88+卵巢癌細(xì)胞株IDO的表達(dá)。且不同濃度的白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ

3、誘導(dǎo)人MyD88+卵巢癌細(xì)胞株培養(yǎng)24h、48h后，隨著白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ藥物濃度的增加或藥物作用時間的延長抑制IDO蛋白表達(dá)水平越明顯。
　　3、WesternBlot法結(jié)果示：白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ藥物濃度為10umol/L和白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ藥物濃度為50umol/L時誘導(dǎo)人MyD88+卵巢癌細(xì)胞24h后下調(diào)腫瘤細(xì)胞內(nèi)IDO蛋白表達(dá)的倍數(shù)無明顯差異（P>0.05）。
　　4、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ的不同藥物濃度誘導(dǎo)人 MyD88+卵巢癌細(xì)胞，隨著白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ藥

4、物濃度的升高、作用時間的增加，下調(diào)人 MyD88+卵巢癌細(xì)胞中IDO蛋白水平表達(dá)的倍數(shù)在藥物誘導(dǎo)48小時、白術(shù)內(nèi)酯 I濃度在100umol/L時最強（P<0.05），有顯著性差異。
　　5、不同藥物濃度（10umol/L、50umol/L、100umol/L）白術(shù)內(nèi)酯I和不加藥分別誘導(dǎo)不同比例的人 MyD88+卵巢癌細(xì)胞與正常人外周血 T淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)72小時后，隨著白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ藥物濃度升高，T淋巴細(xì)胞的增殖越明顯（P＜0.05）；

5、
　　6、在白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ相同的藥物濃度下，不同比例的人MyD88+卵巢癌細(xì)胞與正常人外周血T淋巴細(xì)胞，在比例為S:T=8000個/孔:40000個/孔時，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ藥物濃度為100umol/L時，T淋巴細(xì)胞的增殖最明顯。
　　研究結(jié)論:
　　1、人MyD88+卵巢癌細(xì)胞中存在IDO蛋白的高表達(dá)；
　　2、白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ通過抑制TLR4/MyD88信號通路的活性下調(diào)人MyD88+卵巢癌細(xì)胞中免疫抑制分子 IDO蛋白的表達(dá)