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文檔簡介
1、目的重組慢病毒介導TGF-β3/BMP-2聯(lián)合基因轉染兔骨髓間充質干細胞誘導其軟骨細胞分化，并比較其與TGF-β3單基因轉染誘導軟骨細胞分化的效率.
方法全骨髓貼壁法分離、培養(yǎng)兔骨髓間充質于細胞，CCK-8法繪制細胞生長曲線，流式細胞術檢測細胞表面抗原，培養(yǎng)后通過重組慢病毒分別轉染陰性對照（N組）、TGF-β3單基因（T組）、TGF-β3/BMP-2聯(lián)合基因(TB組)，轉染后培養(yǎng)14天，熒光顯微鏡下觀察各組細胞形態(tài)，RT-PC
2、R、Westernblot分別檢測SOX-9、蛋白多糖、Ⅱ型膠原在基因水平與蛋白水平的表達量，甲苯胺藍染色與Ⅱ型膠原免疫細胞化學檢測細胞外基質表達。
結果流式細胞術檢測造血干細胞標志物(CD34，2.07％)、白細胞表面抗原(HLA-DR，1.73％)均為陰性，透明質酸受體(CD44，82.79％)為陽性，熒光顯微鏡觀察誘導后細胞形態(tài)多為多角形、方形或者類圓盤狀，RT-PCR、Western blot結果均示T組、TB組SOX
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