NKL30抑制宮頸癌機制探討.pdf

1、目的:
　　探討NKL30及其類似物抑制宮頸癌的機制。
　　方法:
　　用不同濃度(5、10、20、40μM) NKL30及其類似物A和B處理宮頸癌細胞Hela24小時，用CellTiter-Glo Luminescent Cell ViabilityAssay測定不同濃度藥物處理后宮頸癌細胞Hela的細胞活性;提取不同濃度下NKL30及其類似物A和B處理24小時后的HeLa細胞核，用HDAC colorimetric

2、 assay kit Color deLys(BIOMOL ResearchLaboratories，Plymouth Meeting，PA)測定核提取物的HDAC活性;將Hela細胞共轉染3×MEF2和β-gal熒光素酶表達質粒，不同濃度下NKL30及其類似物A和B處理24小時后測定MEF2轉錄激活情況;用Western blot方法測定不同濃度下NKL30處理24小時后正常宮頸細胞Hacat，宮頸癌細胞Hela，Caski,C33A

3、的MEF2下游靶基因Nur77的蛋白表達量。用統(tǒng)計學方法比較分析不同藥物濃度下NKL30及其類似物A和B對宮頸癌細胞Hela的細胞活力、HDAC活性、MEF2的轉錄活性、Nur77表達量是否存在顯著性差異。
　　結果:
　　1.NKL30以及它的類似物A和B抑制宮頸癌細胞的活力。且呈計量依賴效應。
　　2.NKL30及它的類似物A和B顯示了抑制HDACs酶活性的作用，與濃度梯度無明顯關系。
　　3.NKL30以及

4、它的類似物A和B增強MEF2的轉錄活性，且呈計量依賴效應。
　　4.NKL30刺激細胞核孤生受體Nur77的生成，且呈計量依賴效應。
　　結論:
　　1.NKL30以及它的類似物A和B抑制宮頸癌細胞的活力;
　　2.NKL30及它的類似物抑制宮頸癌的作用與其阻斷class(Ⅱ)aHDAC-MEF2相互作用進而激活MEF2轉錄活性而非抑制HDAC活性有關。
　　3.NKL30誘導宮頸癌細胞生成Nur77可能為