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文檔簡介
1、目的:本實驗初步研究了Cr(Ⅵ)對果蠅S2細胞增殖的影響及其凋亡機制,為Cr(Ⅵ)誘導細胞凋亡機制的深入研究提供了部分實驗依據(jù),期待為后期研究Cr(Ⅵ)誘導人類細胞凋亡機制提供理論依據(jù)。
方法:含不同濃度Cr(Ⅵ)(0、50、100、200、400、800μmol/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)果蠅S2細胞;CCK8法檢測培養(yǎng)基中不同濃度Cr(Ⅵ)對果蠅S2細胞增殖的影響;熒光顯微鏡觀察細胞形態(tài)改變;流式細胞儀檢測S2細胞凋亡率;分光光
2、度法檢測培養(yǎng)基上清中SOD、MDA含量及Drice相對活化程度;熒光定量PCR檢測凋亡相關基因:P53、Drice、Debcl、Buffy的表達情況。
結果:隨著Cr(Ⅵ)濃度升高,S2細胞的生存率逐漸降低并存在劑量依賴關系;Cr(Ⅵ)濃度不超過400μnmol/L時,S2細胞早期凋亡率隨著Cr(Ⅵ)濃度升高逐漸升高,Cr(Ⅵ)濃度為800μmol/L時,S2細胞早期凋亡率下降但壞死及晚期凋亡率顯著上升;Cr(Ⅵ)濃度為4
3、00μmol/L時明顯觀察到染色質濃染、凋亡小體的形成,當Cr(Ⅵ)濃度達到800μmol/L時,可明顯觀察到細胞崩解、壞死;隨著Cr(Ⅵ)處理濃度增加,SOD含量逐漸降低、MDA含量逐漸升高,Drice相對活化程度亦逐漸降低;400μmol/L組P53 mRNA表達是對照組1.85倍,Debcl mRNA表達是對照組0.05倍,Drice mRNA表達是對照組0.35倍,Buffy mRNA表達無明顯改變。
結論:Cr(
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