先天性腎盂輸尿管連接處梗阻性腎積水的神經(jīng)性因素探討.pdf

1、廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文先天性腎盂輸尿管連接處梗阻性腎積水的神經(jīng)性因素探討姓名：洪淳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：楊琳琳20090511廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文先天性腎盂輸尿管連接處梗阻性腎積水的神經(jīng)性因素探討2標(biāo)本的獲取、制片標(biāo)本獲取后于10％甲醛溶液中固定24h，二甲苯透明，梯度酒精脫水，石蠟包埋，做3Ilm厚連續(xù)切片。3HE染色各組樣本在石蠟包埋切片后行常規(guī)HE染色，光鏡下觀察各組標(biāo)本是否存在有神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。4免疫組化檢測(cè)標(biāo)本

2、中PGP95的表達(dá)按照EnVisionSystem二步法分步驟進(jìn)行免疫組化。棕褐色示PGP95免疫活性陽(yáng)性部位。計(jì)數(shù)按照Weidner等的方法并加以改進(jìn)：先在低倍視野內(nèi)(100)找到組織切片內(nèi)神經(jīng)纖維密度最高的區(qū)域，即“熱點(diǎn)“，選取三個(gè)“熱點(diǎn)“；然后在高倍視野內(nèi)(200)計(jì)數(shù)神經(jīng)纖維的數(shù)目。分辨不清的不計(jì)入計(jì)數(shù)結(jié)果。計(jì)數(shù)由兩名病理科主治以上醫(yī)師采用雙盲法分別對(duì)同一組織切片進(jìn)行計(jì)數(shù)，取兩者計(jì)數(shù)中較高數(shù)據(jù)作為該片的計(jì)數(shù)結(jié)果。結(jié)果用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)誤

3、表示。5電子顯微鏡下觀察結(jié)果各隨機(jī)從A、B組中選取10例，標(biāo)本取得后在2分鐘內(nèi)立即投入戊二醛中行固定，樹脂包埋，用特制的超薄切片機(jī)(ultramicrotome)切成超薄切片，再經(jīng)醋酸鈾和檸檬酸鉛等進(jìn)行電子染色，而后行電鏡檢查。電鏡下觀察神經(jīng)纖維情況。評(píng)價(jià)兩組間是否存在差異情況。結(jié)果1HE染色三組樣本：手術(shù)切除的腎盂輸尿管連接處狹窄段(實(shí)驗(yàn)組A組)3l例；同一患兒輸尿管手術(shù)切緣(對(duì)照組B組)3l例；產(chǎn)前排除泌尿系異常的32周以上引產(chǎn)或死