結腸癌細胞和成纖維細胞相互作用中腫瘤細胞IGFBP7表達與Wnt信號通路.pdf

1、結直腸癌由于其發(fā)病率高和預后差目前仍是嚴重危害人類健康的常見消化系統(tǒng)惡性腫瘤。近年來隨著腫瘤微環(huán)境理論逐漸受到人們的重視，腫瘤和間質(zhì)的相互作用亦成為腫瘤研究熱點。越來越多的實驗研究表明，腫瘤細胞周圍間質(zhì)可能會分泌某種因子影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展；病理學家已經(jīng)注意到，在結直腸癌組織中，癌巢周圍出現(xiàn)明顯的促纖維組織增生，提示在結直腸癌中腫瘤間質(zhì)細胞尤其是成纖維細胞在腫瘤發(fā)生發(fā)展發(fā)揮著重要的作用。
　　 IGFBP7(Insulin-lik

2、egrowthfactorbindingprotein7)即胰島素樣生長因子結合蛋白7，是我們實驗室首次在結腸腺癌-正常粘膜的差減文庫中篩選出來的抑癌基因，是一種分泌型蛋白，可以抑制腫瘤細胞生長，促進腫瘤細胞凋亡，與病人良好預后呈正相關。我們前期研究表明，結腸癌細胞和成纖維細胞相互作用能促進結腸癌細胞IGFBP7表達，促進成纖維細胞活化。
　　 目前研究表明Wnt信號通路是結直腸癌發(fā)生發(fā)展的重要機制之一，那么這個信號通路是否參與

3、了結腸癌細胞與成纖維細胞的相互作用并直接影響IGFBP7的表達?這正是我們的研究目標。本實驗采用RT-PCR、Real-timePCR、Westernblotting等方法，首先在腫瘤細胞和成纖維細胞相互作用模型(雙層共培養(yǎng)和條件共培養(yǎng)細胞培養(yǎng)模型)中證實相互作用時腫瘤細胞IGFBP7表達升高。接著，通過分別加入Wnt通路的激動劑LiCl和抑制劑DKK-1模擬腫瘤細胞IGFBP7表達變化。結果發(fā)現(xiàn)加入LiCl后IGFBP7表達明顯下調(diào)，

4、加入DKK-1后IGFBP7表達明顯上升。同時，我們采用相同的方法檢測相互作用系統(tǒng)中Wnt信號通路相關靶基因如c-my和cyclinD1和相關蛋白如β-catenin和TCF4的表達變化，發(fā)現(xiàn)靶基因和相關蛋白的表達均降低。
　　 我們的實驗結果表明結腸癌細胞和成纖維細胞相互作用中腫瘤細胞內(nèi)Wnt信號通路受到抑制，并且在腫瘤細胞中的IGFBP7高表達受Wnt信號通路的負性調(diào)節(jié)。
　　 通過上述實驗，我們得到以下結論：