瘢痕疙瘩組織CDC2L1基因甲基化及蛋白CDK11p58表達的相關(guān)研究.pdf

1、目的：利用甲基化特異性PCR及亞硫酸氫鹽測序法檢測瘢痕疙瘩組織CDC2L1啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)，應用western blot比較正常皮膚組織與瘢痕疙瘩組織CDK11p58蛋白激酶的表達情況，通過它與細胞凋亡之間的聯(lián)系，探討基因甲基化與瘢痕疙瘩發(fā)生發(fā)展之間的關(guān)系。
　　 方法：選擇經(jīng)病理確診的8例瘢痕疙瘩患者，年齡在10～27之間，平均年齡21.4歲，其中男性患者3例，女性患者5例。瘢痕疙瘩患者術(shù)前均未行放療和注射治療。收集瘢痕疙

2、瘩切除術(shù)后的瘢痕疙瘩組織，應用MSP方法CDC2L1基因啟動子區(qū)CpG島的甲基化狀態(tài)，選取其中存在異常甲基化的組織(共4例;其中3例為女性患者，1例為男性患者)，應用BSP法進行測序驗證。同時應用蛋白免疫印跡法(Western Blot法)檢測4例CDC2L1基因存在異常甲基化和4例該基因無異常甲基化的組織標本中CDK11p58蛋白激酶的表達情況，并收集4例健康人正常皮膚作為對照，相互間比較該蛋白的表達，以驗證甲基化對蛋白表達的影響。<

3、br>　　 結(jié)果：⑴8例瘢痕疙瘩組織中有4例存在CDC2L1基因啟動子區(qū)CpG島異常甲基化，BSP結(jié)果驗證了該基因啟動子區(qū)的甲基化狀態(tài)。⑵Western Blot結(jié)果顯示存在CDC2L1基因啟動子區(qū)CpG島異常甲基化的4例瘢痕疙瘩組織標本CDK11p58蛋白激酶表達明顯減少，甚至缺失。而4例未發(fā)生異常甲基化的組織標本CDK11p58蛋白的表達與4正常皮膚組織相近。
　　 結(jié)論：瘢痕疙瘩組織存在CDC2L1基因CpG島異常甲基化