刀豆蛋白A通過ERK1-2信號(hào)途徑誘導(dǎo)CRL2480細(xì)胞表達(dá)IL-8.pdf

1、白細(xì)胞介素-8（Interleukin-8，IL-8）是炎癥性α-趨化因子，對(duì)于白細(xì)胞的趨化募集和血管生成有重要的作用。內(nèi)皮細(xì)胞是 IL-8的主要來(lái)源之一，研究報(bào)道IL-4和LPS可以通過ERK1/2信號(hào)途徑誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)IL-8。刀豆蛋白A又稱伴刀豆球蛋白A（Concanavalin A，Con A），是一種植物凝集素，具有廣泛的生物活性。雖然研究報(bào)道，Con A可以激活巨噬細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和成纖維細(xì)胞ERK1/2信號(hào)途徑，但尚不清楚

2、Con A是否能夠誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞釋放IL-8及激活ERK1/2信號(hào)途徑。CRL2480細(xì)胞系是常用的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系。本研究以CRL2480細(xì)胞為研究模型，探討Con A對(duì)CRL2480細(xì)胞表達(dá)IL-8以及p-ERK1/2的影響。
　　本研究采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）檢測(cè)CRL2480細(xì)胞IL-8的分泌水平，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-Time P

3、CR）方法檢測(cè)IL-8 mRNA的相對(duì)表達(dá)水平，采用蛋白質(zhì)印跡（Western blot）檢測(cè)細(xì)胞內(nèi) ERK1/2的磷酸化水平，采用免疫熒光技術(shù)檢測(cè) CRL2480細(xì)胞p-ERK1/2的熒光表達(dá)。
　　結(jié)果發(fā)現(xiàn)：Con A能夠誘導(dǎo)CRL2480細(xì)胞IL-8的釋放和IL-8 mRNA相對(duì)表達(dá)水平升高（P均<0.05）；Con A誘導(dǎo)的ERK1/2磷酸化水平也顯著高于對(duì)照細(xì)胞（P<0.05）。此外，絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-

4、activated protein kinase，MAPK）抑制劑（PD98059）和細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）抑制劑（U0126）均顯著抑制了Con A誘導(dǎo)的IL-8蛋白分泌和mRNA表達(dá)。PD98059和U0126也能夠抑制ERK1/2的磷酸化（P均<0.05）。
　　總之，Con A能夠顯著誘導(dǎo)CRL2480細(xì)胞表達(dá)IL-8，其機(jī)制很可能是通過