Ppif基因在NRK細(xì)胞體外缺血再灌注模型中的表達(dá)研究.pdf

1、目的：建立穩(wěn)定的體外大鼠腎小管上皮細(xì)胞(NRK cells)缺血再灌注模型，尋找建立模型的最佳條件。并驗(yàn)證大鼠Ppif基因在該模型中的表達(dá)。
　　 方法：體外培養(yǎng)大鼠腎小管上皮細(xì)胞，以氧糖剝奪(krebs)液及使用去氧劑連二亞硫酸鈉(Na2S2O4)來(lái)模擬體外腎小管上皮細(xì)胞缺血再灌注，Annexin V/PI染色后，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率，用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)Ppif基因(CypD的編碼基因)的mRNA

2、表達(dá)。
　　 結(jié)果：去氧去糖40 min再?gòu)?fù)氧復(fù)糖后，NRK細(xì)胞凋亡率于16 h達(dá)到最高值(P<0.05)。Ppif mRNA在再?gòu)?fù)氧0 h時(shí)，Ppif mRNA有基礎(chǔ)水平的表達(dá)，4 h開(kāi)始升高，8 h時(shí)表達(dá)水平明顯升高，隨再灌注時(shí)間延長(zhǎng)，表達(dá)量逐漸增高，再灌注16 h時(shí)達(dá)高峰，48 h開(kāi)始回落，各時(shí)段與0 h比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論：本模型可以模擬體內(nèi)缺血再灌注機(jī)制，去氧去糖40 min后再?gòu)?fù)