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文檔簡介
1、基因組改組技術(shù)是建立在原生質(zhì)體融合技術(shù)基礎(chǔ)之上的一種菌種選育新技術(shù)。灰黃霉素(gruseifykvub,GF),高產(chǎn)菌株蕁麻青霉(Penicillium urticae Bainier)發(fā)酵周期較長,增加了生產(chǎn)成本和生產(chǎn)周期。本研究擬通過基因組改組技術(shù),以篩選出發(fā)酵周期較短或效價(jià)較高的蕁麻青霉菌株。 本研究的主要結(jié)果如下: (1)探索了蕁麻青霉原生質(zhì)體的高效制備以及再生方法:采用0.6 mol/L NaCl作為滲透壓穩(wěn)定
2、劑,菌齡為28℃培養(yǎng)20小時(shí),0.01mol/L DTT預(yù)處理0.5小時(shí),0.7%纖維素酶+0.7%蝸牛酶+0.5%溶菌酶28℃酶解3.5 h,PDA高滲雙層培養(yǎng)基平板分離。結(jié)果表明原生質(zhì)體的產(chǎn)量達(dá)到2.09x106個(gè)/ml,再生率達(dá)到21.2%: (2)通過對(duì)誘變條件的探討確定了最佳誘變方案,對(duì)原始出發(fā)菌株的誘變采用UV與NTG復(fù)合誘變處理的方法,先用254 nm波長紫外線誘變處理150秒,再用1毫克/毫升的NTG溶液誘變處理
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