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1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文心肺復(fù)蘇后大鼠神經(jīng)細(xì)胞損傷的機(jī)理研究姓名:潘曙明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):急診醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:楊興易2002.5.1心肺復(fù)蘇后大鼠神經(jīng)細(xì)胞損傷的機(jī)理研究中文摘要目的:采用窒息合并冰氯化鉀停跳液致大鼠心跳驟停心肺復(fù)蘇模型,研究全腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞損傷的可能機(jī)制。劈法:本實(shí)驗(yàn)采用窒息合并冰氯化鉀停跳液致大鼠心跳驟停,5分鐘后開(kāi)始心肺復(fù)蘇。SpragueDawley大鼠28只,雌雄各半,隨機(jī)分5組:對(duì)照組(假手術(shù)組)、
2、復(fù)蘇后3小時(shí)組、復(fù)蘇后6小時(shí)組、復(fù)蘇后12小時(shí)組、復(fù)蘇后24小時(shí)組:對(duì)照組4只,其余每組6只。采用酶生化法測(cè)定復(fù)蘇后3、6、12和24小時(shí)血漿中CKBB的含量;采用放射免疫法測(cè)定復(fù)蘇后3、6、12和24小時(shí)血漿中TNF—a和I乙l0的含量;并對(duì)復(fù)蘇后6、12和24小時(shí)神經(jīng)功能評(píng)分。采用TUNEL方法和透射電鏡觀察復(fù)蘇后神經(jīng)細(xì)胞的凋亡情況;采用免疫組化的方法觀察復(fù)蘇后3、6、12和24小時(shí)腦組織中bcl一2、bax、bak和NFKB的表達(dá)
3、情況。結(jié)果:復(fù)蘇后3小時(shí)CKBB就明顯升高,6小時(shí)為高峰;復(fù)蘇后3、6、12和24小時(shí)血漿中TNFa和IL1口的含量無(wú)明顯變化。假手術(shù)組無(wú)細(xì)胞凋亡現(xiàn)象發(fā)生,復(fù)蘇后3小時(shí)大鼠腦皮質(zhì)神經(jīng)元就出現(xiàn)細(xì)胞凋亡,復(fù)蘇后24小時(shí)海馬區(qū)TUNEL陽(yáng)性率為6O%;復(fù)蘇后bcl一2在海馬區(qū)的表達(dá)不斷上升,但明顯較bax表達(dá)為弱,bcl2/bax比例失衡;復(fù)蘇后6小時(shí)開(kāi)始有NF—xB表達(dá),到24小時(shí)達(dá)112%。結(jié)論:細(xì)胞凋亡可能是大鼠全腦缺血再灌注后神經(jīng)細(xì)胞
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