尖吻蝮毒液類凝血酶的序列分析和異源表達(dá).pdf

1、安徽大學(xué)碩士學(xué)位論文尖吻蝮毒液類凝血酶的序列分析和異源表達(dá)姓名：金雛鳳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：查向東20070401尖吻蝮毒液類凝血酶的序列分析和異源表達(dá)由于質(zhì)量或純度不高，有時(shí)也會(huì)產(chǎn)生毒副作用。相比之下，若采用基因工程方法生產(chǎn)酶制劑，則藥物成分單一可靠，療效更為確切，無出血等毒副作用，而且可以縮短生產(chǎn)周期，降低生產(chǎn)成本。本實(shí)驗(yàn)將以尖吻蝮毒液總RNA的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板所擴(kuò)增出的產(chǎn)物與融合硫氧還蛋白的載體pBAD／rh

2、ioTOPO相連接，成功地在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)出了目的蛋自。該表達(dá)系統(tǒng)不僅提供了基因工程生產(chǎn)類凝血酶制劑的途徑，同時(shí)也為分析各種類凝血酶結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系提供了良好的試驗(yàn)體系。目前，蛇毒類凝血酶的非融合表達(dá)尚未見成功報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)針對(duì)蛇毒類凝血酶非融合表達(dá)困難的這一現(xiàn)象，通過優(yōu)化設(shè)計(jì)重組質(zhì)粒pBV220～TLE，對(duì)其一級(jí)結(jié)構(gòu)與表達(dá)的關(guān)聯(lián)特性進(jìn)行了初步研究。通過尖吻蝮毒液類凝血酶的異源表達(dá)研究我們發(fā)現(xiàn)，影響類凝血酶表達(dá)的關(guān)鍵因素在于其mRNA