吉西他濱對人乳腺癌MCF-7細胞株CN-Ⅱ、APE-Ref-1 mRNA和蛋白表達的影響.pdf

1、乳腺癌的發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居首位,并有逐年增加趨勢。早期乳腺癌經手術、放療、化療等綜合治療,療效較好,晚期則失去手術機會,以化療為主。目前,含蒽環(huán)類及紫杉類藥物的化療方案為晚期乳腺癌治療的首選,盡管療效顯著,仍有20％~30%的患者發(fā)生耐藥。在晚期乳腺癌的治療中,對曾經接受過多程化療、特別是蒽環(huán)類及紫杉類藥物耐藥的患者的后續(xù)治療是目前臨床所面臨的難題。隨著第三代化療藥物如吉西他濱、卡培他濱、長春瑞濱的出現(xiàn),晚期乳腺癌化療的效果有了一

2、定程度提高。如何提高二線藥物化療的有效率成為亟待解決問題之一,目前研究主要集中在根據(jù)不同的患者個體特征選擇最合適的治療方案,即個體化治療,使得對不同患者的治療更具針對性,從而一定程度上提高了化療療效,同時也避免無效藥物的使用給患者身體及經濟上帶來的損失。近年來隨著分子藥理學和分子生物學的發(fā)展,人們對腫瘤耐藥機制及由基因異常表達導致不同個體對藥物治療反應及預后不同有了進一步的了解和認識,從而也清醒地意識到這是進行腫瘤個體化治療的基礎和條件

3、。
　　目的:研究人乳腺癌MCF-7細胞株經吉西他濱處理時CN-Ⅱ,APE/Ref-1 mRNA和蛋白質表達的變化,并探討二者在乳腺癌化療耐藥中所起的作用。
　　方法:不同濃度吉西他濱作用于人乳腺癌MCF-7細胞株24h,分別以Real-time PCR及Western blot方法測定用藥后CN-Ⅱ,APE/Ref-1的mRNA及蛋白表達情況;以相對耐藥低濃度吉西他濱干預MCF-7細胞,流式細胞儀測定0、3、7、10、13

4、和16天細胞凋亡比例,并以Real-time PCR及Western blot方法測定存活細胞CN-Ⅱ,APE/Ref-1的mRNA及蛋白表達情況。
　　結果:吉西他濱作用于人乳腺癌MCF-7細胞株24h后,CN-Ⅱ,APE/Ref-1的mRNA及蛋白表達水平均明顯上升,并與吉西他濱的濃度呈正相關。相對耐藥濃度藥物干預后第0、3、7、10、13和16天細胞CN-Ⅱ、APE/Ref-1的mRNA及蛋白表達水平均逐漸增加,與干預天數(shù)成

5、正相關,并與凋亡細胞比例的變化趨勢一致,CN-Ⅱ、APE/Ref-1表達水平從第十天起明顯增加,第十六天達到最高。并且干預至第10、13、16天后存活的相對耐藥細胞中的APE1和CN-ⅡmRNA和蛋白表達水平與非耐藥細胞相比,結果具有統(tǒng)計學意義。(P<0.05)
　　結論:CN-Ⅱ,APE/Ref-1在乳腺癌化療時表達明顯增強,可能與化療耐藥性的產生有關,并提示針對CN-Ⅱ,APE/Ref-1的靶向干預可能有助于提高乳腺癌的化療敏