吉西他濱對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞株CN-Ⅱ、APE-Ref-1 mRNA和蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、乳腺癌的發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居首位,并有逐年增加趨勢(shì)。早期乳腺癌經(jīng)手術(shù)、放療、化療等綜合治療,療效較好,晚期則失去手術(shù)機(jī)會(huì),以化療為主。目前,含蒽環(huán)類及紫杉類藥物的化療方案為晚期乳腺癌治療的首選,盡管療效顯著,仍有20％~30%的患者發(fā)生耐藥。在晚期乳腺癌的治療中,對(duì)曾經(jīng)接受過(guò)多程化療、特別是蒽環(huán)類及紫杉類藥物耐藥的患者的后續(xù)治療是目前臨床所面臨的難題。隨著第三代化療藥物如吉西他濱、卡培他濱、長(zhǎng)春瑞濱的出現(xiàn),晚期乳腺癌化療的效果有了一

2、定程度提高。如何提高二線藥物化療的有效率成為亟待解決問(wèn)題之一,目前研究主要集中在根據(jù)不同的患者個(gè)體特征選擇最合適的治療方案,即個(gè)體化治療,使得對(duì)不同患者的治療更具針對(duì)性,從而一定程度上提高了化療療效,同時(shí)也避免無(wú)效藥物的使用給患者身體及經(jīng)濟(jì)上帶來(lái)的損失。近年來(lái)隨著分子藥理學(xué)和分子生物學(xué)的發(fā)展,人們對(duì)腫瘤耐藥機(jī)制及由基因異常表達(dá)導(dǎo)致不同個(gè)體對(duì)藥物治療反應(yīng)及預(yù)后不同有了進(jìn)一步的了解和認(rèn)識(shí),從而也清醒地意識(shí)到這是進(jìn)行腫瘤個(gè)體化治療的基礎(chǔ)和條件

3、。
　　目的:研究人乳腺癌MCF-7細(xì)胞株經(jīng)吉西他濱處理時(shí)CN-Ⅱ,APE/Ref-1 mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的變化,并探討二者在乳腺癌化療耐藥中所起的作用。
　　方法:不同濃度吉西他濱作用于人乳腺癌MCF-7細(xì)胞株24h,分別以Real-time PCR及Western blot方法測(cè)定用藥后CN-Ⅱ,APE/Ref-1的mRNA及蛋白表達(dá)情況;以相對(duì)耐藥低濃度吉西他濱干預(yù)MCF-7細(xì)胞,流式細(xì)胞儀測(cè)定0、3、7、10、13

4、和16天細(xì)胞凋亡比例,并以Real-time PCR及Western blot方法測(cè)定存活細(xì)胞CN-Ⅱ,APE/Ref-1的mRNA及蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果:吉西他濱作用于人乳腺癌MCF-7細(xì)胞株24h后,CN-Ⅱ,APE/Ref-1的mRNA及蛋白表達(dá)水平均明顯上升,并與吉西他濱的濃度呈正相關(guān)。相對(duì)耐藥濃度藥物干預(yù)后第0、3、7、10、13和16天細(xì)胞CN-Ⅱ、APE/Ref-1的mRNA及蛋白表達(dá)水平均逐漸增加,與干預(yù)天數(shù)成

5、正相關(guān),并與凋亡細(xì)胞比例的變化趨勢(shì)一致,CN-Ⅱ、APE/Ref-1表達(dá)水平從第十天起明顯增加,第十六天達(dá)到最高。并且干預(yù)至第10、13、16天后存活的相對(duì)耐藥細(xì)胞中的APE1和CN-ⅡmRNA和蛋白表達(dá)水平與非耐藥細(xì)胞相比,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P<0.05)
　　結(jié)論:CN-Ⅱ,APE/Ref-1在乳腺癌化療時(shí)表達(dá)明顯增強(qiáng),可能與化療耐藥性的產(chǎn)生有關(guān),并提示針對(duì)CN-Ⅱ,APE/Ref-1的靶向干預(yù)可能有助于提高乳腺癌的化療敏