多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌AdeABC外排機(jī)制研究.pdf

1、近年來非發(fā)酵菌在臨床分離中呈增加趨勢，其中最主要菌種為不動(dòng)桿菌屬細(xì)菌和銅綠假單胞菌，而不動(dòng)桿菌中又以鮑曼不動(dòng)桿菌最為常見。鮑曼不動(dòng)桿菌已成為繼銅綠假單胞菌之后的重要臨床分離菌。 近幾年來，多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌已經(jīng)在全球各地出現(xiàn)播散，甚至造成了爆發(fā)流行，并且伴隨著耐藥性的不斷增強(qiáng)。既往碳青霉烯類抗生素被認(rèn)為是治療不動(dòng)桿菌重癥感染的首選抗生素，而新型甘氨酰環(huán)類藥物替加環(huán)素的開發(fā)對治療MDRAB也被寄予了很大的希望。然而有關(guān)碳青霉烯類

2、抗生素耐藥不動(dòng)桿菌已經(jīng)開始出現(xiàn)和流行，甚至泛耐株的出現(xiàn)，給臨床抗感染治療帶來了很大的困難，也對院內(nèi)感染的控制提出了新的要求。藥物的主動(dòng)外排系統(tǒng)是造成細(xì)菌多重耐藥的一個(gè)重要原因，近年來越來越引起重視。2001年法國學(xué)者在鮑曼不動(dòng)桿菌中發(fā)現(xiàn)了AdeABC外排泵系統(tǒng)，它介導(dǎo)了氨基糖甙類，氟喹諾酮類，頭孢噻肟，四環(huán)素，米諾環(huán)素，紅霉素，氯霉素，甲氧芐啶等耐藥。最新研究又發(fā)現(xiàn)，它的過度表達(dá)還在介導(dǎo)鮑曼不動(dòng)桿菌對碳青霉烯類抗生素和替加環(huán)素的耐藥中發(fā)

3、揮重要作用，對多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌新發(fā)現(xiàn)的耐藥機(jī)制進(jìn)行研究，以指導(dǎo)臨床醫(yī)生的用藥及流行的控制。 本研究收集2004年12月到2005年12月臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌700株，根據(jù)前期藥敏試驗(yàn)及地區(qū)、克隆分布選擇其中101株多重耐藥株及12株敏感鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行研究。 研究內(nèi)容： 1.對3種抗生素包括亞胺培南、美羅培南，替加環(huán)素進(jìn)行外排泵抑制劑PApN(phe-Argβ-naphthyl-amide，又名MC2071

4、10)抑制實(shí)驗(yàn)，了解外排表型； 2.利用PCR擴(kuò)增技術(shù)對外排泵耐藥基因adeA、adeB、adeC及其調(diào)控基因adeS、adeR進(jìn)行篩選，探討基因分布及基因型在克隆中的分布特征。 3.利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real time PCR，RT-PCR)技術(shù)測定adeB的表達(dá)情況，并探討其與外排表型，基因型及耐藥之間的關(guān)系。 通過以上研究得到我國MDRAB菌株AdeABC外排系統(tǒng)與多重耐藥的關(guān)系，對亞胺培南、美

5、羅培南，替加環(huán)素3種抗生素耐藥的介導(dǎo)作用。 研究結(jié)果： 1.我國鮑曼不動(dòng)桿菌中，AdeABC外排泵基因不僅在耐藥菌中，在敏感菌中存在率也高，而且地區(qū)分布和克隆分布十分廣泛。調(diào)控基因adeS、adeR在敏感菌株中陽性率較低。 2.我國MDRAB中，AdeABC外排泵系統(tǒng)的過度表達(dá)介導(dǎo)了其對亞胺培南耐藥，并可能和美羅培南、替加環(huán)素耐藥有關(guān)。在同樣的外排泵抑制條件下，外排表型越明顯，提示AdeB表達(dá)率越高。 3