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1、丹參是我國(guó)重要的傳統(tǒng)中藥材,近年的研究表明丹參的水溶性成分具有多方面的藥理活性,其中最重要的就是丹參水溶性成分的抗氧化活性。丹參水溶性成分主要是酚酸類物質(zhì),其中以丹酚酸B含量最為顯著。本文用水楊酸處理丹參的三種離體培養(yǎng)物,以期提高丹參離體培養(yǎng)物中丹酚酸B的含量,為從丹參的離體培養(yǎng)物中篩選有效成分丹酚酸B的高產(chǎn)細(xì)胞系提供方法和數(shù)據(jù)參考。
本文首先對(duì)野生丹參進(jìn)行了組織培養(yǎng),以丹參的幼嫩葉片為外植體,進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo),優(yōu)化了激素配比
2、。以愈傷組織的誘導(dǎo)率,生長(zhǎng)狀態(tài)為指標(biāo),得出愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L。以70%甲醇為溶劑,采用超聲波法提取丹參三種離體培養(yǎng)物的酚酸類物質(zhì),利用HPLC法測(cè)定培養(yǎng)物中丹酚酸B的含量。結(jié)果表明,三種培養(yǎng)物中均含有丹酚酸B,且培養(yǎng)物叢生芽中含量最高,達(dá)到50.90mg/g。以不同濃度的水楊酸處理丹參三種離體培養(yǎng)物,研究水楊酸處理對(duì)丹參的三種離體培養(yǎng)物的生長(zhǎng)和丹酚酸B含量的影響。結(jié)果表明水楊
3、酸對(duì)丹參三種離體培養(yǎng)物的增殖均有抑制作用,且抑制效應(yīng)隨水楊酸濃度的升高而增強(qiáng);對(duì)于未分化的丹參離體培養(yǎng)物,水楊酸表現(xiàn)出低濃度促進(jìn)高濃度抑制丹酚酸B的生成,其中0.05mmol/L的水楊酸能較好的提高丹參未分化離體培養(yǎng)物中丹酚酸B含量;而對(duì)于已分化的丹參離體培養(yǎng)物,水楊酸則抑制了丹酚酸B的生成。最后研究了經(jīng)水楊酸處理后的丹參離體培養(yǎng)物中丹酚酸B含量的變化與其抗氧化活性之間的關(guān)系。以抑制羥自由基能力、抗脂質(zhì)過(guò)氧能力以及對(duì)高鐵鹽鐵氰化鉀系統(tǒng)的
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