激素對牛卵母細胞體外成熟及重組胚發(fā)育的影響.pdf

1、激素在卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)中是一種經(jīng)常用的成分，雖然在試驗中常有人在使用，但并沒有人系統(tǒng)的就激素的種類，使用的劑量等研究過對卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)的影響。本實驗主要研究促卵泡刺激素（FSH）、促黃體生成素（LH）、雌二醇（E2）、孕馬血清促性腺激素（PMSG）和人絨毛膜促性腺激素（HCG）對延邊黃牛卵母細胞體外成熟及重組胚發(fā)育的影響，從而提高延邊黃牛體細胞克隆的效率。利用屠宰后牛卵巢，用抽吸法回收卵母細胞，然后在不同種類、濃度激素條件

2、下進行卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)，最后將成熟的卵母細胞經(jīng)核移植所構(gòu)成的重組胚進行體外培養(yǎng)。得出的實驗結(jié)果如下：
　　1.在成熟液中添加不同濃度的FSH對延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆效率的影響的試驗中，添加10μg/mL一組在卵母細胞成熟率、重組胚的卵裂率及囊胚發(fā)育率方面均顯著高于其它濃度組（P<0.05），所以確定10μg/mL是單獨使用FSH時最適合于延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆的最佳濃度。2.在成熟液中添加不同濃度

3、的LH對延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆效率的影響的試驗中，添加30μg/mL組在卵母細胞成熟率、重組胚的囊胚發(fā)育率方面均顯著高于其它濃度組（P<0.05），所以確定30μg/mL是單獨使用LH時最適合于延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆的最佳濃度。
　　3.在成熟液中添加不同濃度的E2對延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆效率的影響的試驗中，添加1.5μg/mL組的各個指標均優(yōu)于其他濃度組，但差異不顯著（P>0.05），所

4、以確定1.5μg/mL是單獨使用 E2時最適合于延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆的最佳濃度。
　　4.在成熟液中同時添加 FSH、LH、E2對延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆效率的影響的試驗中，同時添加共同作用組無論在卵母細胞成熟率，重組胚的卵裂率還是囊胚發(fā)育率都顯著高于單獨使用一種激素的效果（P<0.05）。5.在成熟液中添加不同濃度的PMSG對延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆效率的影響的實驗中，添加10 IU/mL

5、組在卵母細胞成熟率、8-16細胞率及囊胚發(fā)育率都好于其它各組，但差異不顯著（P>0.05），所以確定10 IU/mL是單獨使用 PMSG時最適合于延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆的最佳濃度。
　　6.在成熟液中添加不同濃度的HCG對延邊黃牛卵母細胞體外成熟及體細胞克隆效率的影響的試驗中，添加15 IU/mL組在卵母細胞成熟率、8-16細胞率及囊胚發(fā)育率方面都好于其它各組，但差異不顯著（P>0.05），所以確定15 IU/mL是