IBVN蛋白原核表達(dá)及間接ELISA方法建立和初步應(yīng)用.pdf_第1頁
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1、ClassifiedIndex：Confidential(yes／no)：noCode：10224N0120620497DissertationfortheProfessionalMasterDegreeProkaryoticexpressionofIBVNproteinandDevelopmentofIndirectIBVNproteinmediatedELISACandidate：WangXinSupervisor：ProfLiGu

2、angxingDegreeCategory：MasterofVeterinaryMedicineCollege：CollegeofVeterinaryMedicineResearchField：BasicVeterinaryMedicineStudyMode：FulltimeHarbinChinaJune2014東北農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)碩士學(xué)位論文227間接ELISA方法重復(fù)性試驗24228間接ELISA方法敏感性試驗24229間接ELISA方

3、法檢測臨床樣本：243結(jié)果2531IBVHH06株N基因的克隆與鑒定一25311RPPCR擴增N基因25312重組質(zhì)粒pMDl8TN的鑒定25313pMDl8TN序列測定及分析一2732IBVHH06株N蛋白原核表達(dá)27321擴增目的片段N基因27322重組質(zhì)粒pET030aN的鑒定28323表達(dá)產(chǎn)物SDSPAGE的鑒定一29324表達(dá)產(chǎn)物的Westernblot鑒定3033IBVHH06株N蛋白多克隆抗體的制備及其鑒定3l331多克隆

4、抗體的間接ELlSA檢測和Westernblot檢測一31332多克隆抗體的IFA檢測一3134間接EUSA方法的建立32341最佳抗原包被濃度及血清稀釋度的確定32342最佳封閉液的選擇和時間的確定33343最佳血清孵育時間的確定33344HRP標(biāo)記羊抗雞IgG(二抗)最佳稀釋度和時間的確定33345最佳底物顯色時間的確定33346臨界值確定35347重復(fù)性試驗35348特異性試驗35349敏感性試驗353410臨床樣品檢測364討論

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