Rg1通過(guò)抑制破骨細(xì)胞的分化與成熟保護(hù)小鼠關(guān)節(jié)的機(jī)制研究.pdf

1、目的：已有實(shí)驗(yàn)表明Rg1通過(guò)抑制組織的炎性反應(yīng)，保護(hù)組織的結(jié)構(gòu)與功能，但其機(jī)制尚不清楚。本研究通過(guò)Rg1抑制RANKL誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞分化為破骨細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)和Rg1抑制膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（CIA）小鼠骨關(guān)節(jié)炎的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，探索Rg1抑制骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)制。
　　方法：體外實(shí)驗(yàn):培養(yǎng)由RANKL誘導(dǎo)小鼠骨髓來(lái)源的RAW264.7細(xì)胞形成的破骨細(xì)胞，使用不同濃度Rg1，檢測(cè)破骨細(xì)胞形成后抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性和骨吸收面積

2、;RT-PCR檢測(cè)破骨細(xì)胞功能性基因TRAP、CTSK、CTR、MMP-9的表達(dá);RT-PCR，Western blot檢測(cè)破骨分化轉(zhuǎn)錄因子c-Fos、c-Jun、NFATc1的表達(dá)以及破骨細(xì)胞信號(hào)通路NF-κB、MAPK的磷酸化水平。體內(nèi)實(shí)驗(yàn):CIA小鼠腹腔注射Rg1或安慰劑，對(duì)小鼠關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)分，關(guān)節(jié)軟骨行HE染色;阿辛藍(lán)染色及TRAP染色，觀察Rg1對(duì)CIA小鼠關(guān)節(jié)軟骨的破壞及體內(nèi)破骨細(xì)胞分化與成熟的影響。
　　結(jié)

3、果：體外實(shí)驗(yàn):Rg1呈現(xiàn)濃度依賴性地抑制由RANKL誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）的活性，破骨細(xì)胞的數(shù)量和破骨細(xì)胞的骨吸收面積;同時(shí)Rg1顯著抑制RANKL誘導(dǎo)的TRAP，CTSK，MMP9，CTR的基因表達(dá)，抑制RANK信號(hào)通路中NF-κB p65及MAPK(ERK、JNK、p38)磷酸化水平及相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子c-Fos，c-Jun，NFATc1的表達(dá)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn):Rg1能顯著降低CIA小鼠的關(guān)節(jié)炎評(píng)分，控制關(guān)節(jié)炎的炎性癥狀。