冬凌草甲素通過(guò)MAPK-p38信號(hào)通路增強(qiáng)吉西他濱對(duì)胰腺癌的抗腫瘤活性.pdf

1、溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文論文題目：璽凌堇里塞通過(guò)叢P墜衛(wèi)墨璺信墨通路增強(qiáng)直酉他答辯委員會(huì)主席：答辯委員會(huì)成員：論文答辯日期：2013年5月25日溫州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文冬凌草甲素通過(guò)MAPKp38信號(hào)通路增強(qiáng)吉西他濱對(duì)胰腺癌的抗腫瘤活性中文摘要目的探討冬凌草甲素在體內(nèi)外能否增強(qiáng)吉西他濱對(duì)胰腺癌抗腫瘤效應(yīng)及其可能的作用機(jī)制。方法在體外，不同濃度的冬凌草甲素(0uM，20uM，40uM，60ItM，80pM，100uM)作用胰腺癌BXPC3細(xì)胞

2、24h，48h，72h后，CCK一8法檢測(cè)胰腺癌細(xì)胞株BXPC3細(xì)胞的增值；冬凌草甲素(40pM)與吉西他濱(20uM)單獨(dú)及聯(lián)合處理細(xì)胞48小時(shí)，并設(shè)立對(duì)照組，采用AnnexinVFITC／PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡；流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)細(xì)胞周期的分布；運(yùn)用RT—PCR檢測(cè)冬凌草甲素(4011M)單獨(dú)及聯(lián)合吉西他濱(20uM)作用48小時(shí)后BXPC3細(xì)胞中p38與p53基因的表達(dá)水平；蛋白印跡法(Westernblot)檢測(cè)冬

3、凌草甲素(40pM)單獨(dú)及聯(lián)合吉西他濱(20pM)作用48小時(shí)后BXPC一3細(xì)胞中p38與p53相應(yīng)蛋白的表達(dá)水平。在體內(nèi)，我們建立胰腺癌BXPC3細(xì)胞的裸鼠皮下移植瘤動(dòng)物模型，待到腫瘤體積達(dá)到一定大小時(shí)，按照隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)分配分成4個(gè)實(shí)驗(yàn)組：生理鹽水組(對(duì)照組)，吉西他濱組(80mg／kg)，冬凌草甲素組(40mg／kg)，聯(lián)合用藥組(吉西他濱80mg／kg冬凌草甲素40mg／kg)。每組IO只，各組給藥均采用腹腔注射的方法，每3天一次

4、，共11次。末次用藥結(jié)束2周后，取出腫瘤，測(cè)量腫瘤體積并稱(chēng)腫瘤重量：Westernblot法檢測(cè)各組瘤組織中pp38和pp53蛋白的表達(dá)；采用RT—PCR檢測(cè)各組瘤組織中p38和p53基因的表達(dá)。結(jié)果冬凌草甲素抑制胰腺癌BXPC一3細(xì)胞的增值呈明顯的劑量與時(shí)間依賴(lài)性，冬凌草甲素作用胰腺癌細(xì)胞48小時(shí)后，IC50值為3886uM；運(yùn)用AnnexinVHTC／PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡結(jié)果示：冬凌草甲素或吉西他濱單獨(dú)作用時(shí)，BXPC一3