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文檔簡介
1、聚酰胺-胺(PAMAM,polyamidoamine)以其獨(dú)有的分子結(jié)構(gòu)和物理特性,能夠通過靜電疏水等作用與DNA緊密結(jié)合,并將其縮聚,保護(hù)DNA不被降解,是近年來廣泛使用的非病毒基因治療載體。但是相比病毒載體,PAMAM的轉(zhuǎn)染效率仍然很低,這是由于它在轉(zhuǎn)染過程中存在多個屏障。對于PAMAM/DNA復(fù)合物與細(xì)胞結(jié)合并進(jìn)入細(xì)胞的具體機(jī)制的理解,克服PAMAM轉(zhuǎn)染過程的細(xì)胞膜屏障,將有助于我們找到提高PAMAM轉(zhuǎn)染效率方法。 本文
2、采用卵磷脂脂質(zhì)體模擬細(xì)胞膜骨架,并在其中加入膽固醇單組分,通過等溫微量量熱法,Zeta電勢和透射電子顯微鏡,對PAMAM/DNA復(fù)合物與脂質(zhì)體的相互作用進(jìn)行考察,探索PAMAM/DNA復(fù)合物與脂質(zhì)體膜的作用機(jī)制,以及膽固醇在其中所起到的作用。 熱力學(xué)研究表示,對于含有和不含有膽固醇的脂質(zhì)體,PAMAM/DNA復(fù)合物主要通過靜電作用與其表面結(jié)合,反應(yīng)由焓驅(qū)動,膽固醇的加入將使結(jié)合在表面的PAMAM/DNA復(fù)合物能夠嵌入脂雙層中,
3、從而引起焓變、熵變的增大,甚至出現(xiàn)聚集的吸熱過程。PAMAM/DNA復(fù)合物的電荷比大于1時,脂質(zhì)體的負(fù)電勢隨著PAMAM/DNA復(fù)合物的加入而減小,說明兩者通過靜電作用結(jié)合,膽固醇在靜電結(jié)合的過程中沒有作用。通過電鏡觀察,對于不加膽固醇的脂質(zhì)體,PAMAM/DNA復(fù)合物結(jié)合在脂質(zhì)體表面,可以看到兩球結(jié)合的狀態(tài),對于加入膽固醇的脂質(zhì)體,PAMAM/DNA復(fù)合物進(jìn)入脂質(zhì)體內(nèi)部,脂質(zhì)體粒徑增大,仍為球狀。各種檢測均表明.PAMAM/DNA復(fù)合
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