基于痘病毒的溶瘤病毒及其溶瘤效應(yīng)的研究.pdf

1、腫瘤生物治療技術(shù)是近年來(lái)因生物技術(shù)發(fā)展而興起的一種腫瘤治療手段，是指采用生物制劑，直接或通過(guò)調(diào)節(jié)宿主的腫瘤防御機(jī)制間接抑制或消除腫瘤生長(zhǎng)的一種治療方法，被認(rèn)為是除手術(shù)、化療、放療之外的第四種腫瘤治療模式。能特異性殺傷腫瘤細(xì)胞的溶瘤病毒是腫瘤生物治療中重要的方法之一，也是當(dāng)前腫瘤治療基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用的熱點(diǎn)與發(fā)展方向。近年來(lái)國(guó)際上應(yīng)用重組痘苗病毒進(jìn)行腫瘤生物治療取得了重大進(jìn)展，開(kāi)發(fā)出了新一代溶瘤病毒，臨床試驗(yàn)顯示對(duì)肝癌等惡性腫瘤具有較好的

2、療效，且具有良好的穩(wěn)定性和安全性。
　　痘苗病毒(vaccinia virus，VACV)是痘病毒家族成員之一，世界性天花消除過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。生物醫(yī)學(xué)工作者對(duì)VACV的生物學(xué)特性、致病性、免疫性等諸多方面已有了較為透徹的了解。近年來(lái)，國(guó)外一些學(xué)者致力于將重組痘苗病毒(rVACV)應(yīng)用于腫瘤的生物治療，其中一些研究已取得較大突破，特別是JX-594已進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)，為最終攻克腫瘤帶來(lái)了新的希望，應(yīng)用前景十分廣闊，但國(guó)內(nèi)的同類(lèi)

3、研究目前尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　本課題擬以VACV的細(xì)胞毒性為切入點(diǎn)，利用基因重組技術(shù)，敲除野生型VACV的VGF和/或TK基因，獲得具有腫瘤靶向性的溶瘤病毒VACV-VGF-、VACV-TK-和vvDD，并對(duì)這些重組病毒的體內(nèi)外復(fù)制特性、致病性、抗腫瘤效應(yīng)等進(jìn)行了研究。
　　研究結(jié)果表明，體外在所檢測(cè)的幾株細(xì)胞中包括CV-1、BSC-1、Vero、Hela細(xì)胞中病毒都可以較好地復(fù)制，而在B16.F10和CT26.WT細(xì)胞中病毒的

4、復(fù)制受到了限制;MTS法細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)中，針對(duì)不同的細(xì)胞各病毒的殺傷力有所不同，且對(duì)B16.F10細(xì)胞基本不表現(xiàn)殺傷作用;在小鼠黑色素瘤模型中，相比于野生型VACV，rVACV主要集中分布于腫瘤組織中，且在病毒注射Day9時(shí)除VACV-VGF-外，VACV-TK-和vvDD在腦、脾等非腫瘤組織中幾乎檢測(cè)不到，而腫瘤組織中高達(dá)108 pfu/100mg;相比于野生型病毒，重組病毒注射后小鼠生存時(shí)間不同程度有所延長(zhǎng)，但相對(duì)VACV-VGF-或