嗜麥芽窄食假單胞菌耐藥性及中藥對(duì)其抑菌活性的研究.pdf

1、目的:嗜麥芽窄食假單胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）是一種絕對(duì)需氧的、無(wú)芽孢的非發(fā)酵革蘭陰性桿菌，廣泛存在于自然界中，也可以長(zhǎng)期寄居在人的呼吸道及腸道等部位。近年來(lái)，因廣譜抗生素的大量使用，免疫抑制劑的應(yīng)用及侵入性檢查或治療手段的增多，該菌引發(fā)的醫(yī)院感染不斷上升，已成為院內(nèi)感染的一個(gè)重要致病菌。此外，由于該菌的固有和獲得性耐藥強(qiáng)，耐藥機(jī)制復(fù)雜，且體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果難以判讀，使臨床治療面臨更為嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。因此

2、，尋找更為有效的抗嗜麥芽窄食假單胞菌感染的治療方法已經(jīng)成為醫(yī)務(wù)工作者迫切需要解決的問(wèn)題。我國(guó)中藥資源豐富，價(jià)格低廉，許多研究資料表明，某些中藥不但有較強(qiáng)的抗菌活性，且較抗生素不易產(chǎn)生耐藥性，甚至可以逆轉(zhuǎn)細(xì)菌耐藥，已引起國(guó)內(nèi)外研究者的廣泛關(guān)注。本文所選五倍子等14種中藥對(duì)一些常見(jiàn)致病菌有不同程度的抑菌作用，目前鮮見(jiàn)中藥對(duì)嗜麥芽窄食假單胞菌抑菌作用的相關(guān)性報(bào)道。本研究通過(guò)分析醫(yī)院內(nèi)嗜麥芽窄食假單胞菌臨床分布特征及耐藥現(xiàn)狀，檢測(cè)嗜麥芽窄食假單

3、胞菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的水平及其與耐藥性的關(guān)系，重點(diǎn)觀(guān)察了五倍子等14種中藥對(duì)嗜麥芽窄食假單胞菌的抑菌作用，旨在為臨床治療該菌的感染提供新的思路和方法。
　　方法:
　　1.收集嗜麥芽窄食假單胞菌的菌株并鑒定菌株標(biāo)本來(lái)源于河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院及河北以嶺醫(yī)院兩所醫(yī)院的患者，分離菌株統(tǒng)一用法國(guó)梅里埃公司的ID32GN鑒定板進(jìn)行鑒定。
　　2.采用K-B法對(duì)嗜麥芽窄食假單胞菌進(jìn)行15種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)。
　　3.采用亞胺

4、培南-EDTA紙片增效法檢測(cè)金屬β-內(nèi)酰胺酶(MBL);采用表型確證試驗(yàn)紙片法檢測(cè)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)。
　　4.比較ESBLs陽(yáng)性菌株與ESBLs陰性菌株對(duì)抗生素的耐藥程度有無(wú)差異。采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析數(shù)據(jù)，利用秩和檢驗(yàn)，以P＜0.05為顯著性標(biāo)準(zhǔn)。
　　5.采用瓊脂稀釋法檢測(cè)五倍子等14種中藥對(duì)嗜麥芽窄食假單胞菌的抑菌作用。
　　6.比較中藥對(duì)ESBLs陽(yáng)性菌株與ESBLs陰性菌株的抑菌效

5、果有無(wú)差異。
　　結(jié)果:
　　1.鑒定出63株嗜麥芽窄食假單胞菌陽(yáng)性菌，菌株分布主要集中在ICU，占58.73％，其次為呼吸內(nèi)科20.63％;臨床標(biāo)本分布:痰液及呼吸道分泌物占82.54％，膿液占7.94％，血液、尿液各占3.17％，腦脊液及腹水各1例，占1.59％;感染人群分布:60歲以上的老年患者占69.84％，20歲以下的患者僅有1例占1.59％。
　　2.63株嗜麥芽窄食假單胞菌對(duì)頭孢曲松、頭孢噻肟、亞胺培南、

6、氨曲南、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢吡肟、慶大霉素耐藥情況非常嚴(yán)重，其耐藥率分別為96.83％、96.83％、95.24％、93.65％、87.30％、80.95％、79.37％、77.78％、69.84％;對(duì)環(huán)丙沙星、頭孢他啶、替卡西林/棒酸的耐藥率分別為52.38％、47.62％、46.03％;而對(duì)米諾環(huán)素的敏感性最高，敏感率為88.89％，其次對(duì)左氧氟沙星，復(fù)方新諾明也表現(xiàn)為較高的敏感性，其敏感率依次為85.71％

7、，82.54％。無(wú)1株對(duì)所測(cè)抗菌藥物全部敏感或僅對(duì)一種抗菌藥物耐藥，僅2株(3.17％)對(duì)兩種抗菌藥物耐藥，其余61株(96.83％)均對(duì)三種及三種以上抗菌藥物耐藥，其中大部分多重耐藥株同時(shí)對(duì)7～11種抗菌藥物耐藥。
　　3.檢測(cè)的MBL的陽(yáng)性菌株數(shù)為60株，陽(yáng)性率為95.24％;檢測(cè)的ESBLs的陽(yáng)性菌株數(shù)為24株，陽(yáng)性率為38.10％。
　　4.15種抗生素對(duì)ESBLs陽(yáng)性菌株與ESBLs陰性菌株的抑菌效果無(wú)明顯差異(P

8、＞0.05)。
　　5.檢測(cè)的14種中藥中，石斛、土茯苓、板藍(lán)根、龍膽的水煎液在本次體外實(shí)驗(yàn)中即使在最高的濃度(1∶20)下對(duì)嗜麥芽窄食假單胞菌仍無(wú)抑菌作用;五倍子、西青果、金銀花、烏梅、連翹、黃連、金錢(qián)草、黃芩、忍冬藤、蒲公英的水煎液對(duì)嗜麥芽窄食假單胞菌有不同程度的抑菌作用，其MIC50依次為0.055、0.529、1.447、1.280、0.583、1.680、1.823、2.185、7.550、17.910mg/ml,MIC

9、90依次為0.109、1.058、2.894、1.280、1.165、1.680、1.823、2.185、3.775、17.910mg/ml。其中抑菌效果最好的是五倍子，西青果、金銀花、烏梅、連翹、黃連的抑菌效果也較好。
　　6.五倍子、西青果、金銀花、烏梅、連翹、黃連對(duì)ESBLs陽(yáng)性菌株與ESBLs陰性菌株的抑菌效果無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論:
　　1.嗜麥芽窄食假單胞菌主要分離自60歲以上的老年住院患者，科室分布以IC

10、U為主，感染部位多為呼吸道，標(biāo)本多以痰液為主。
　　2.嗜麥芽窄食假單胞菌除對(duì)米諾環(huán)素、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明的耐藥率較低外，對(duì)其他多種抗菌藥物耐藥現(xiàn)狀非常嚴(yán)重，對(duì)部分抗菌藥物甚至高度耐藥。故應(yīng)積極開(kāi)展細(xì)菌的培養(yǎng)及藥物敏感性試驗(yàn)，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，合理選擇和應(yīng)用抗菌藥物并加強(qiáng)消毒隔離措施，防止該菌的播散。
　　3.五倍子、西青果、金銀花、烏梅、連翹、黃連對(duì)嗜麥芽窄食假單胞菌抑菌作用較好，且對(duì)產(chǎn)ESBLs陽(yáng)性菌株與ESBLs陰