hPER1 bHLH-PAS結(jié)構(gòu)域酵母雙雜交系統(tǒng)的構(gòu)建.pdf_第1頁(yè)
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1、通過(guò)RT-PCR擴(kuò)增hPER1 bHLH-PAS結(jié)構(gòu)域的編碼序列,擴(kuò)增的片斷與質(zhì)粒載體pGBKT7連接重組為誘餌質(zhì)粒pGBKT7/hPer1<,bHLH-PAS>.檢測(cè)轉(zhuǎn)化誘餌質(zhì)粒的酵母AH109是否有自激活發(fā)生以及重組誘餌蛋白的毒性.取自然流產(chǎn)胎兒的下丘腦區(qū)腦組織提取總RNA.自總RNA提取的mRNA用BD SMART Ⅲ technology擴(kuò)增ds cDNA.將重組誘餌質(zhì)粒、ds cDNA和pGADT7-Rec轉(zhuǎn)化酵母AH109進(jìn)

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