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文檔簡介
1、本論文對鴨瘟病毒(DPV)gJ基因進行了生物信息學(xué)分析,原核表達了gJ基因去跨膜區(qū)和信號肽的截段基因gJ(M),并制備了截段基因表達蛋白的多克隆抗體,主要內(nèi)容可歸納如下:
1.鴨瘟病毒gJ基因的分子特性分析
鴨瘟病毒gJ基因大小為1620bp,編碼539個氨基酸,理論等電點為6.037。鴨瘟病毒gJ蛋白在其N端有信號肽,C端有一個跨膜區(qū),閾值為0.5時共有32個潛在的磷酸化位點,這些位點包括15個絲氨酸位點,9個蘇氨
2、酸位點,8個酪氨酸預(yù)測位點。通過對gJ蛋白做二級結(jié)構(gòu)預(yù)測,結(jié)果表明無規(guī)則卷曲的氨基酸含量高(占50.65%),為蛋白抗原表位提供了良好的空間。其ORF含62個稀有密碼子,含量占33.3%,包括9個連續(xù)的稀有密碼子串。
2.鴨瘟病毒gJ截段基因的原核表達及多克隆抗體的制備
成功構(gòu)建了gJ全基因和gJ截段基因的重組原核表達質(zhì)粒pET-32a(+)-gJ和pET-32a(+)-gJ(M),并將其轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21(DE
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